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目的: 大肠癌(colorectal cancer,CRC)包括结肠癌和直肠癌,是常见的恶性肿瘤之一,在全世界由癌症引起的死亡率中居第四位。随着经济的发展和人民生活水平的不断提高,中国大肠癌的发病率和死亡率也在不断攀升。大肠癌的形成是多因素共同作用的结果,其中肥胖是一个高危的因素。肥胖可以增加30-70%大肠癌的发病风险。脂酰辅酶A合成酶5(acyl-CoA synthetase5,ACS5)是脂肪合成及分解代谢的关键酶,近年来针对ACS5与肿瘤关系的多项研究指出,其异常表达可能与子宫内膜癌、神经胶质瘤、小肠肿瘤、膀胱癌等肿瘤的发生、癌细胞分化、肿瘤的浸润、淋巴结的转移以及早期复发、针对治疗药物的耐药有关。对于发病率及死亡率均居高位的大肠癌来说,至今针对其与ACS5关系的研究非常有限,在大肠癌的发生发展过程中,ACS5扮演何种角色发挥何种作用,这个机制尚不明确。本课题研究ACS5在大肠癌中的表达情况,探讨ACS5与大肠癌临床病理参数的关系,以期为大肠癌的诊断和治疗提供新的靶点,为降低中国的大肠癌发病率,提高大肠癌的治愈率做点贡献。 方法: ①采用Western blot检测人大肠癌细胞(HT29、SW480)及正常大肠上皮细胞(HCoEpiC)中ACS5蛋白的表达情况。 ②采用免疫组织化学法检测22例正常大肠粘膜、28例大肠腺瘤性息肉、31例大肠癌组织中ACS5蛋白的表达。 ③采用原位杂交技术检测22例正常大肠粘膜、28例大肠腺瘤性息肉、31例大肠癌组织中ACS5mRNA的表达。 ④用统计软件分析ACS5蛋白及ACS5mRNA的表达与大肠癌临床病理特征之间的关系。 结果: ①人大肠癌细胞HT29、SW480中ACS5蛋白表达明显高于正常大肠上皮细胞HCoEpiC,P<0.01,差异均有统计学意义。大肠癌细胞HT-29、SW480相对于正常细胞HCoEpiC的ACS5蛋白相对表达量分别是7.694,8.414。 ②ACS5蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤性息肉及大肠癌组织中的表达率分别为1.64%(3/22)、7.14%(2/28)、58.06%(18/31)。大肠癌组分别与大肠腺瘤性息肉组、正常大肠粘膜组相比,P<0.05,差异有统计学意义。大肠腺瘤性息肉组与正常大肠粘膜组相比,P>0.05,差异无统计学意义。 ③ACS5mRNA在正常大肠粘膜、大肠腺瘤性息肉组及大肠癌组织中的表达率分别为18.18%(4/22)、21.43%(6/28)、74.19%(23/31)。大肠癌组分别与大肠腺瘤性息肉组、正常大肠粘膜组相比,P<0.05,差异有统计学意义;大肠腺瘤性息肉组与正常大肠粘膜组相比,P>0.05,差异无统计学意义。 ④大肠癌伴有淋巴结转移组ACS5蛋白表达阳性率为75%,无伴淋巴结转移组ACS5蛋白表达阳性率40%,两者相比X2值为3.89,P<0.05,差异有统计学意义。T3+T4期大肠癌组ACS5蛋白表达阳性率为78.57%,T1+T2期大肠癌组ACS5蛋白表达阳性率41.48%,两者相比X2值为4.41,P<0.05,差异有统计学意义。ACS5蛋白阳性表达与大肠癌有无伴淋巴结转移及肿瘤的浸润深度(TNM分期中T分期)明显正相关(P<0.05),而与肿瘤的位置、患者的性别及年龄、肿瘤细胞的分化程度无明显相关(P>0.05)。 ⑤大肠癌伴有淋巴结转移组ACS5mRNA表达阳性率为93.75%,无伴淋巴结转移组ACS5mRNA表达阳性率53.33%,两者相比X2值为6.6,P<0.05,差异有统计学意义。T3+T4期大肠癌组ACS5mRNA表达阳性率为92.86%,T1+T2期大肠癌组ACS5mRNA表达阳性率58.82%,两者相比X2值为4.64,P<0.05,差异有统计学意义。ACS5mRNA阳性表达与大肠癌有无伴淋巴结转移及肿瘤的浸润深度(TNM分期中T分期)呈明显正相关(P<0.05),而与肿瘤的位置、患者的性别及年龄、肿瘤细胞的分化程度无明显相关(P>0.05)。 结论: Western blot法显示:大肠癌细胞HT29、SW480中ACS5的表达水平高于正常大肠细胞HCoEpiC中ACS5的表达水平;免疫组织化学法及原位杂交技术对组织切片的检测也提示大肠癌组织中ACS5的表达显著高于正常大肠粘膜组织及大肠腺瘤性息肉组织中ACS5的表达。体内细胞实验及体外组织实验均显示ACS5在大肠癌中过表达,因此考虑ACS5与大肠癌的发生有关。统计分析ACS5表达与肿瘤有无伴淋巴结转移及肿瘤的浸润程度呈正相关,因此推测ACS5参与了大肠癌的侵袭和迁移。所以,ACS5有助于大肠癌恶性程度评价及预后的的判断,可能为大肠癌的诊断及治疗提供新的靶点。