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目的:研究VEGF/Neuropilin信号通路中关键分子VEGF-C、VEGF-D及受体Neuropilin-1(NRP-1)、Neuropilin-2(NRP-2)表达与甲状腺乳头状癌(PapillaryThyroid Carcinoma，PTC)及其淋巴结转移的关系，探讨VEGF/Neuropilin信号通路在PTC中的分子机制。 方法: 1、样本选自台州市中心医院2011年6月-2013年8月期间的手术组织标本，其中PTC组织标本64例，非甲状腺乳头状癌(Non-Papillary Thyroid Carcinoma，NPTC)23例，正常对照组标本(Normal Control Group，NCG)40例，取自结节性甲状腺肿病灶旁大体观正常的甲状腺组织。所有样本均经病理证实。 2、QRT-PCR法分别检测PTC及NCG组织中VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2的mRNA的表达情况，t检验分析组间VEGF-C、VEGF-D、NRP-1、NRP-2的mRNA表达差异，以P＜0.05为差异有统计学意义。 3、免疫组织化学S-P法检测PTC、NPTC、NCG组织中的VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2蛋白表达情况，采用SPSS17.00统计软件包进行数据整理和统计分析，计数资料比较采用x2检验，相关性分析采用Spearman相关性分析。 4、Western-blot法检测PTC及NCG组织中VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2蛋白表达情况，数据比较采用t检验，P＜0.05认为差异有统计学意义。 5、PTC周围中微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD)值的检测:采用免疫组化法检测CD34、D2-40分别标记新生肿瘤血管、淋巴管，计算MVD和LVD，采用F检验和t检验，分析与VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2表达之间的相关性，P＜0.05认为差异有统计学意义。 结果: 1、RT-PCR检测，PTC组织中VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2的mRNA表达水平较对照组明显升高(P＜0.05)。免疫组化检测示VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2蛋白表达在PTC组中明显升高，PTC阳性率为67.19％，62.5％，70.3％，65.63％，NPTC的阳性率为52.17％，34.78％，13.04％，8.70％，NCG的阳性率为17.5％,12.5％,7.5％,12.5％。 2、Western blot法亦证实VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2蛋白在PTC中均较NCG中表达升高(P＜0.05)。 3、VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2表达与PTC临床病理特征相关性:Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴结转移各组中VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2表达均显著强于Ⅰ+Ⅱ期、无淋巴结转移各组，结果具有统计学意义(P＜0.05);肿瘤＞1cm表达高于肿瘤≦1cm，但结果无统计学意义(P＞0.05);患者年龄和性别各组之间的表达无显著性差异(P＞0.05)。 4、PTC中VEGF-C、VEGF-D和NRP-1、NRP-2表达的相关性:PTC组织中VEGF-D表达均与NRP-1、NRP-2表达呈正相关(P＜0.05);VEGF-C表达与NRP-1、NRP-2表达均无关(P＞0.05)。 5、VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2表达与MVD、LVD的相关性:PTC中MVD、LVD均增生，且主要集中在癌组织与正常组织交界区域，以CD34阳性标记血管内皮细胞，D2-40阳性标记淋巴管内皮细胞。随着VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2表达程度的加深(0、1+、2+、3+)，MVD与LVD数量均增加。具体来看，随着VEGF-C表达程度加深，MVD数量显著增加，经方差分析具有明显差异(F=106.60;138.97，P＜0.01)，再经两两之间LSD-t检验，提示四组相互之间有明显差异(P＜0.05)，LVD数量增加，但经方差分析组间比较无明显差异(F=2.44，P＞0.05); VEGF-D、NRP-1、NRP-2表达程度加深，MVD数量均有递增趋势，但经方差分析组间比较无明显差异(F=2.18;1.14;1.59，P＞0.05)，LVD数量均显著增加，经方差分析组间比较有明显差异(F=180.37;108.68;254.65，P＜0.01)，再经两两之间LSD-t检验，提示四组相互之间有明显差异(P＜0.05)。 结论: 1、PTC组织标本中，VEGF/Neuropilin信号通路中VEGF-C、VEGF-D、NRP-1、PRP-2在基因转录和蛋白质表达水平上均明显上调，提示VEGF/Neuropilin信号通路在PTC的发生过程中起促癌作用。 2、VEGF-C、VEGF-D、NRP-1和NRP-2蛋白表达与PTC肿瘤分期以及淋巴结转移相关;VEGF-C高表达与PTC周边微血管密度增高密切相关，VEGF-D、NRP-1和NRP-2高表达则与周边微淋巴管密度增高密切相关，以上明确了VEGF-C，D/NRP-1，2与PTC进展有关。 3、PTC组织中VEGF-D表达均与NRP-1、NRP-2表达呈正相关，提示VEGF-D/NRP-1，2具有配体/受体相关性;VEGF-C表达与NRP-1、NRP-2表达均无关。以上说明VEGF-C可能更多作为癌基因通过下游PI3K/Akt通路促进肿瘤的进展，并促进血管生成，而VEGF-D与其受体NRP-1和NRP-2结合促进微淋巴管的生成，进而促进肿瘤的浸润和转移。