【摘 要】
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研究目的:通过建立Sprague-Dawley大鼠股骨骨折合并创伤性脑损伤(TBI)的动物模型,观察伤后大鼠血清对成骨细胞、成熟破骨细胞及破骨前体细胞Raw264.7的影响,探索四肢骨折合并颅
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研究目的:通过建立Sprague-Dawley大鼠股骨骨折合并创伤性脑损伤(TBI)的动物模型,观察伤后大鼠血清对成骨细胞、成熟破骨细胞及破骨前体细胞Raw264.7的影响,探索四肢骨折合并颅脑损伤后,机体及体液因素成骨细胞和破骨细胞的作用。
研究方法:取250-300g SD大鼠40只,平均分入股骨骨折合并脑损伤组(A组)、单纯股骨骨折组(B组)、单纯脑损伤组(C组)和完全对照组(D组)。建立股骨骨折及创伤性脑损伤模型,于伤后24小时取每组全部10只大鼠血液并提取血清,混合后按10%加入细胞培养液,观察其对大鼠的成熟破骨细胞、成骨细胞及其与RAW264.7细胞共培养体系的作用。计数加入血清3天后成熟破骨细胞TRAP染色阳性数目;定量测定7天后成骨细胞碱性磷酸含量。对于共培养体系,将RAW264.7细胞与成骨细胞共培养10天后生成的破骨样多核巨细胞进行TRAP染色鉴定并计数,采用RT-PCR半定量测定破骨细胞标志酶MMP-9和TRAP的表达。
实验结果:加入血清后,各组成熟破骨细胞TRAP染色阳性数目无明显统计学差异。A组和B组成骨细胞增殖速度较C组和D组加快,提前进入对数生长期及平台期,碱性磷酸酶定量结果较C组和D组升高。同时,经诱导产生的TRAP染色阳性细胞相对C组和D组减少,破骨细胞标志酶基因MMP-9和TRAP表达量减低。
实验结论:创伤性脑损伤后,体液因素中的血清对已成熟的破骨细胞未表现出显著作用,但可使破骨前体细胞的分化成熟受到抑制,同时促进成骨细胞增殖;导致成骨作用显著,骨痂较非脑损伤患者显著膨大,另一方面缺乏足够的成熟破骨细胞致使骨痂改建不良,骨形成与骨吸收的平衡向前者倾斜,从而形成大量异常的骨痂,引起骨折断端骨痂量增多,骨折愈合加速。
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