猪繁殖与呼吸综合征“自杀性”DNA疫苗与活病毒载体疫苗研究

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猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是近年发现的一种新的病毒性传染病,由动脉炎病毒科的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起,临床上以母猪发热、厌食、早产、流产、死胎、弱仔等繁殖障碍及各种年龄猪的呼吸系统疾病和高死亡率为特征.该病最早于1987年报道于美国南部,现已遍及世界各地,给全球养猪业造成了巨大的经济损失.免疫接种是预防和控制该病的主要措施,目前用于预防PRRS的主要疫苗是弱毒苗和灭活疫苗.尽管弱毒苗能提供较好的免疫保护,但存在毒力返强的危险,并且返强的几率相当高.目前,许多国家已禁止使用弱毒苗,转而使用灭活苗,但灭活苗不仅需多次重复接种,而且效果不稳定,还经常导致免疫失败.可以说,目前采用灭活苗是不得已而为之,迫切需要更加安全、有效的疫苗来预防和控制该病的发生与流行.鉴于此,该研究对PRRSV的"自杀性"DNA疫苗和以伪狂犬病毒(PRV)为载体的二价基因工程疫苗进行了研究,主要研究内容包括:⒈ORF5基因的克隆与序列分析.⒉ORF5基因在大肠杆菌中的高效表达.⒊GP5间接ELISA方法的建立.⒋表达PRRSV GP5的重组伪狂犬病毒TK<->gG<->GP5<+>的构建与免疫反应.⒌表达PRRSV GP5的重组伪狂犬病毒TK<->/gE<->/gI<->/GP5<+>的构建与免疫反应.⒍PRRSV ORF5基因"自杀性"DNA疫苗的构建与免疫效果.
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