蛇毒型神经生长因子对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经重塑的影响

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目的探讨通过侧脑室给予蛇毒型神经生长因子(viper venom nerve growth factor,vNGF)对脑缺血再灌注损伤后大鼠的神经重塑的影响。方法取健康清洁雄性Wistar大鼠90只,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注损伤(ischemia reperfusion injure,I/R)模型,随机分成5组:vNGF-25u组、vNGF-50u组、vNGF-100u组、缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)组和假手术(Sham operated,S)组,每组18只。vNGF组术后采用改良的侧脑室置管术法按实验设计每日给予相应剂量的vNGF。术后每天对各组大鼠进行神经功能评分,检查神经功能恢复的程度;在术后第2、7、14天分批处死大鼠取脑组织提取总RNA,用荧光定量PCR检测脑组织神经前体细胞标志物微管相关蛋白(Doublecortin,DCX)和β-微管蛋白(β-tubulin)表达的改变。结果1.神经功能缺损评分:各组8中的大鼠在缺血再灌注损伤后2-3d时评分最高,随后逐渐降低;vNGF组经侧脑室给予vNGF后与缺血再灌注组相比较可降低评分,改善神经功能缺失症状。2. DCX的表达情况:随着缺血再灌注术后时间的延长,DCX mRNA在各组的表达从第2d开始递增,在第7d达到高峰,第14d时有所下降;术后同一时间,DCX mRNA在vNGF各组的表达均高于在I/R对照组,而在I/R对照组的表达高于在S组;其中在vNGF-50U组中的表达为各组最高(P<0.01)。3.β-tubulin的表达情况:随着术后时间的延长,β-tubulin mRNA在I/R对照组的表达先增加后降低,第7d达到高峰,而在vNGF各组的表达则为逐渐增加;术后同一时间,β-tubulin mRNA在vNGF各组的表达高均于在I/R对照组,在I/R对照组的表达高于在S组;β-tubulin mRNA的表达随着给予vNGF浓度的升高而增加(P<0.01)。结论:脑缺血再灌注损伤后经侧脑室给予vNGF后,可通过正性调节β-Tubulin转导通路和增强Doublecortin迁移效应促进神经再生和神经缺损功能恢复。
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