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铬(Chromium, Cr)作为一种重要的天然金属元素,无论在自然界中还是在工业生产环境中,都与人们的活动息息相关。铬及其化合物特别是六价铬[Cr(Ⅵ)]在许多工业生产中广泛应用。同时,随着社会的不断发展,环境污染越来越严重,铬及其化合物也包含在汽车尾气中。实验表明,铬及其化合物有免疫毒性、生殖毒性、神经毒性、致癌性和肾毒性。其中关于铬及其化物对生殖的影响逐渐被人们所重视。男性生殖能力下降,以致不育症越来越多,这已是不争的事实。而Cr(Ⅵ)易进入生殖细胞内从而影响生殖系统的正常功能。睾丸为雄性生殖系统中最重要的生殖腺,同时也是大多数外源化学物生殖毒性的靶器官。而作为睾丸曲细精管内唯一的体细胞—支持细胞(Sertoli cell, SC),在雄性生殖系统中起着重要作用。SC能够分泌雄激素结合蛋白(androgen binding protein, ABP)、转铁蛋白(transferrin, Tf)和抑制素(inhibin,INH)等,此三者在雄性生殖中起着至关重要的作用,ABP、Tf和INH已经被广泛地用作衡量SC功能的标志。目的：本研究通过体外原代培养大鼠睾丸支持细胞,然后使其暴露于不同浓度的Cr(Ⅵ),从mRNA水平和蛋白表达水平分析Cr(Ⅵ)对支持细胞表达ABP、Tf和INH的影响。以此探讨重铬酸钾对雄性生殖系统的影响,为进一步研究Cr(Ⅵ)的雄性生殖毒性机制提供理论依据。方法：1.首先建立大鼠睾丸支持细胞的体外原代培养模型。2.利用MTT比色法来测定Cr(Ⅵ)对支持细胞活性的影响,并且确定染毒浓度。3.用实时定量RT-PCR对支持细胞ABP、Tf(?)口INH mRNA的表达进行检测。4. Western blot法检测Cr(Ⅵ)作用后ABP、Tf和1NH的蛋白表达水平。5.统计分析。运用SPSS12.0统计软件,采用Levene方差齐性检验、单因素方差分析(analysis of variance, ANOVA),对数据进行统计分析(检验水准a=0.05)。结果：1.通过本实验方法,提取的大鼠SC存活率95%以上,24 h后细胞开始贴壁,48 h后铺开生长良好,纯化后细胞纯度90%以上。2.MTT法结果：当浓度为10-6mol/L时,与对照组进行比较,差异无统计学意义(P>0.05),大于此浓度时,细胞存活率影响明显,因此本课题进一步实验采用10-8mol/L、10-7mol/L和10-6mol/L3个浓度。3.实时定量RT-PCR结果：与对照相比,ABP mRNA与INH mRNA在染毒浓度为10-7mol/L和10-6mol/L时,差异有统计学意义(P<0.05)。Tf mRNA在染毒浓度为10-6mol/L时,差异有统计学意义(P<0.05)。4.ABP、Tf和INH蛋白的表达结果：与对照组相比,ABP与INH的蛋白相对表达量在10-6mol/L浓度时差异有统计学意义(P<0.05)；Tf的蛋白相对表达量在10-6mol/L和10-7mol/L 2个浓度组均有统计学意义P<0.05)；结论：1.六价铬工作液对大鼠睾丸支持细胞具有细胞毒性。在高于10-5mol/L浓度时对支持细胞具有毒性作用。2.六价铬能够引起大鼠支持细胞分泌功能的变化,产生生殖毒性作用。