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以三种类型的六个不同基因型的辣椒品种为试材,对花药发育时期与外部形态的关系,影响辣椒花药培养中愈伤组织形成的几个主要因素以及从愈伤组织诱导芽的分化进行了系统研究,结果表明: 1.辣椒花药的颜色可作为判断花粉发育时期的一个简便而可靠的指标,当花药正面1/2浅紫,背部1/3浅紫时,大部分辣椒花粉处于单核靠边期。 2.在常用于花药培养的NTH、MS和N6这三种培养基中,虽均可诱导花药产生愈伤组织,但以MS培养基诱导效果最好。 3.在供试的6个基因型中,洛椒98系A型的愈伤组织诱导率最高,为11.67%,20138的诱导率最低,为5.56%,并且杂交品种的诱导率均高于常规品种。 4.在辣椒花药培养中的愈伤组织诱导率与花药接种密度在一定范围内呈显著正相关,当花药接种密度达到一定阈值后,能显著提高愈伤组织诱导率,在125ml三角瓶含约30ml培养基的固体培养中,接种密度以30枚花药/瓶为佳。 5.接种前花蕾经1~7d,0~4℃低温预处理有利于花药愈伤组织的形成,其中以3~5d处理效果最好:接种后经12~60h, 32℃短期热激处理,也有利于花药愈伤组织的形成,当超过60h反而抑制愈伤组织的形成;并且单独热激处理的效果稍优于单独低温预处理,而低温预处理与热激处理相配合的效果与单独热激处理的效果差异不明显。 6.活性碳由于具有较强的吸附作用,可以吸附培养中产生的有害物质,因而有利于组织培养,但当活性碳浓度超过一定范围后,反而抑制了愈伤组织的形成。在辣椒花药固体培养中,活性碳的浓度以0.4g/L效果最佳。 7.蔗糖和麦芽糖虽属两种性质不同的糖,但在辣椒花药培养中仅起调节渗透压和提供碳源的作用,在诱导辣椒花药产生愈伤组织效率方面无差异。 8.BA浓度在0.8~1.6mg/L范围内,在辣椒花药愈伤组织诱导率之间差异不明显,但当BA浓度超过2mg/L时,反而抑制了愈伤组织的形成;而增加NAA浓度,有利于愈伤组织形成。 9.将愈伤组织接种在1/2 MS,NAA 0.1mg/L, BA 浓度大于1.5mg/L的培养基上,有利于芽原基的生成;当将具有芽原基的愈伤组织接种到1/2 MS附加不同浓度的KT的培养基中,未诱导出芽,且当KT浓度低于5mg/L 时,愈伤组织产生根;但当将具有芽原基的愈伤组织接种到附加不同浓度BA的培养基中时,仅在BA浓度为5mg/L和6mg/L的培养基中诱导产生芽丛。将芽接入生长培养基中时,芽基部又愈伤组织化,且芽生长缓慢,逐渐失绿,死亡。