MIF在类风湿关节炎的检出及其单核苷酸多态性分析

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第一部分类风湿关节炎患者MIF的检出与临床意义目的:检测类风湿关节炎(RA)患者血清及滑膜中的巨噬细胞移动抑制因子(MIF),探讨MIF检出的临床意义。方法:(1)ELISA方法检测40例RA患者血清中MIF水平,并按RA疾病活动评分(DAS28)将RA组分为活动组(n=25)与非活动组(n=15),同时以20例门诊建康体检者做为对照组;(2)免疫组织化学法检测MIF在13例RA、7例骨关节炎(OA)和4例正常滑膜组织的表达,分析MIF表达与滑膜炎症程度的相关性。结果:(1)RA患者血清中MIF水平(13.79±7.49ng/ml)明显高于对照组(4.57±1.91ng/ml)(P<0.01),其中,活动期(15.94±7.67ng/ml)较非活动期患者(9.07±4.89ng/ml)MIF水平亦明显升高(P<0.01);在RA患者,MIF浓度与DSA28、血沉(SR)、C-反应蛋白(CRP)、晨僵、关节肿胀数(SW28)、关节压痛数(T28)、类风湿因子(RF)呈正相关,但与病程、关节X线破坏程度无统计学意义的相关性;(2)RA患者滑膜组织有MIF的高表达,阳性率(60%)明显高于OA(5.3%)及正常滑膜组织(0.5%)(P<0.01),且与滑膜炎症程度相关(r=0.872),主要表达于炎性细胞、血管内皮细胞和成纤维样滑膜细胞。结论:(1)MIF在RA的病变过程中发挥重要作用;(2)MIF表达水平与RA患者的病情炎症程度相关,可以作为RA病情活动的判断指标。第二部分类风湿关节炎患者MIF基因单核苷酸多态性分析目的:分析类风湿关节炎(RA)患者MIF基因单核苷酸多态性(SNP)。方法:提取45例汉族成人RA患者和30例门诊建康体检者外周血基因组DNA,然后PCR扩增含MIF-173G/C的129bp的目的片断、回收、加热变性、聚丙烯酰胺凝胶电泳和染色,样本同时作DNA序列测定。结果:在43例RA患者中MIF-173G/C基因型为:G/G28例(65.1%),G/C10例(23.2%),C/C5例(11.6%),正常人基因型为:G/G19例(66.3%),G/C8(26.7%),C/C3例(10%),各基因型在两组间的比例无显著性差异(P>0.05)。结论: MIF-173在汉族人中存在多态性,但与RA的易感性无关。
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