银屑病p16基因启动子CpG岛甲基化状态的研究

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银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病,其组织病理特征为表皮过度增殖、炎症细胞聚集和真皮毛细血管增生、延长、迂曲和扩张。由于银屑病的发病机理尚未明确,所以一直是皮肤病学研究中的重点和难点之一。随着现代分子生物学的飞速发展,人们对细胞周期的研究已经取得较大进展。研究发现,细胞周期素依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)与细胞周期素(cyclin)的复合物CDK4/CDK6-cyclinD能促使细胞通过G1期。在正常细胞中,视网膜母细胞瘤抑制蛋白(retinoblastoma tumor suppressor protein,pRb)与一系列转录因子相结合使其失去作用而发挥负性调节细胞增殖功能,这些转录因子在G1后期可被磷酸化的pRb释放,并允许细胞进入S期,CDK4/CDK6-cyclinD复合物的作用可能是在G1后期使pRb磷酸化。抑癌基因p16编码的P16蛋白能特异性结合并抑制CDK4/CDK6,调节pRb磷酸化,因此p16基因在细胞增殖的负性调节中起重要作用。p16基因非甲基化状态是活化转录状态,而启动子区CpG岛甲基化是导致p16抑癌基因失活的重要原因。过去对银屑病p16基因甲基化研究集中在外显子甲基化异常与银屑病的关系,而对p16基因启动子CpG岛甲基化的状况与银屑病发生发展的相关性报道较少。我科以往的研究证实p16基因微卫星杂合性缺失与银屑病的发生发展相关,提示p16基因上游与银屑病的关系密切,可能存在其他形式的改变。由于甲基化特异性PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)这一新技术的进展,使更多的甲基化位点被研究。相比于Southern杂交法和甲基化敏感性酶切的PCR分析法,它不仅能弥补此两种方法的缺点,自身还具有众多显著优点。MSP避免了应用限制性内切酶及由此造成的酶切不完全的问题,同时
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