本文围绕鸭肠炎病毒gC基因疫苗(pcDNA-DEV-gC)在BALB/c小鼠体内的抗原表达和动态分布及DEV弱毒疫苗病毒抗原在BALB/c小鼠体内的动态分布开展了下列研究：①利用纯化的DEV接种家兔制备兔抗DEV血清；②建立了能特异性检测石蜡组织切片中pcDNA-DEV-gC表达产物和DEV病毒抗原的间接免疫酶组织化学(IHC)和间接免疫荧光方法(IFA)；③pcDNA-DEV-gC分别以200μg/只、100μg/只、50μg/只的剂量肌肉注射接种三组BALB/c小鼠，另外pcDNA-DEV-gC以6μg/只、3μg/只、1μg/只的剂量基因枪轰击接种三组BALB/c小鼠；④利用脂质体和壳聚糖包被pcDNA-DEV-gC制成脂质体/DNA疫苗和壳聚糖/DNA疫苗，通过肌肉注射和口服给药接种四组BALB/c小鼠，每只小鼠的免疫剂量中包裹50μgpcDNA-DEV-gC；⑤对照组：单个免疫剂量的DEV弱毒疫苗皮下注射、100μg空白质粒和生理盐水肌肉注射接种三组BALB/c小鼠。免疫后8h、12h、1d、3d、5d、7d、2wk、4wk、6wk、10wk和18wk分别取各组小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、胸腺、胰腺、食道、气管、十二指肠、直肠、盲肠和接种部位（大腿肌肉注射或者腹部皮肤）等组织器官，通过建立的间接免疫酶组织化学和间接免疫荧光方法检测石蜡切片中pcDNA-DEV-gC表达产物和DEV病毒抗原。获得如下结果：　　 1.DEV接种到鸭胚成纤维细胞，37℃孵育72h后显微镜下可见鸭胚成纤维细胞达到75％的细胞病变(CPE)，对照组鸭成纤维细胞不发生细胞病变。兔抗DEV阳性血清经过辛酸-硫酸铵沉淀、DEAE-SephadexA-50离子交换层析处理后，可获得纯化的兔抗DEVIgG。　　 2.建立的间接免疫酶组织化学(IHC)和间接免疫荧光方法(IFA)有较好的特异性，能准确检测BALB/c小鼠组织中pcDNA-DEV-gC的表达产物及DEV病毒抗原。　　 3. pcDNA-DEV-gC通过大腿肌肉注射和腹部皮肤基因枪轰击免疫BALB/c小鼠，免疫后12h即可在免疫部位大腿肌肉和腹部皮肤中检测到抗原产物，1d后抗原产物相继出现在脾、肾、胸腺、胰腺、盲肠、直肠等组织的胞浆中。pcDNA-DEV-gC免疫后1d～6wk，脾、肾和胸腺等组织中检测到的抗原产物较多，其次为免疫部位大腿肌肉与腹部皮肤、心、直肠、盲肠和胰腺，十二指肠肠绒毛上皮细胞检测到零星的抗原产物。肝、肺、脑、食道与气管等组织检测结果为阴性。pcDNA-DEV-gC在脾、肾和胸腺等组织中持续表达时间最长，免疫后6wk仍可在这三个组织中检测到抗原产物。免疫后10wk所有组织都检测不到抗原产物。不同剂量组间同一组织在同一时间点检测到的抗原表达量依次为：200μg组＞100μg组＞50μg组，6μg组＞3μg组＞1μg组，接种剂量跟抗原表达量之间呈现一定的正相关，但非等比例增长。　　 4.脂质体和壳聚糖在肌肉注射或口服给药的途径下，能有效增强pcDNA-DEV-gC在BALB/c小鼠体内的抗原表达，壳聚糖更适合作为pcDNA-DEV-gC基因疫苗的免疫佐剂。　　 5.BALB/c小鼠皮下接种DEV弱毒疫苗，免疫后8h即可在胸腺的淋巴细胞中检测到病毒抗原，免疫后12h病毒抗原出现在脾脏的红髓和白髓中的淋巴细胞中，1d后在心肌细胞、肾小管上皮细胞和肠道上皮细胞中相继检测到病毒抗原，免疫后5d除了脑组织外其他组织器官的病毒抗原检测均显示阳性。免疫后8h～4wk期间胸腺淋巴细胞检测到的病毒抗原最多，脾脏次之。与pcDNA-DEV-gC基因疫苗相比，DEV弱毒疫苗在小鼠各组织中检测到的抗原数量更多，分布范围更广，免疫后5d检测到的病毒抗原数量达到高峰，之后随着时间延伸病毒抗原数量开始减少，6wk后所有组织都检测不到病毒抗原，而pcDNA-DEV-gC基因疫苗在小鼠体内的存留时间较长，免疫后6wk在脾脏和胸腺中仍可检测到抗原产物。