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目的:探讨卵母细胞冻融过程对内质网蛋白57(Endoplasmic Reticulum protein57,ERp57)定位的影响及与受精的关系。 方法:采用血清促性腺激(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,HCG)进行小鼠促排卵,收集输卵管壶腹部成熟卵母细胞(新鲜组),采用玻璃化冷冻技术冷冻复苏卵母细胞(冻融组),应用免疫荧光技术检测ERp57在两组卵母细胞中的定位;利用穿卵实验检测两组卵母细胞的受精情况;用抗ERp57抗体封闭卵母细胞ERp57功能,检测封闭ERp57对新鲜和冻融卵母细胞受精的影响。采用受精率和受精指数评估受精情况,卡方分析法统计受精率,单因素方差分析法统计受精指数,P<0.05为差异有统计学差异。 结果:免疫荧光结果表明ERp57表达于新鲜成熟卵母细胞表面,定位于核对立面;冻融后,ERp57分布于卵母细胞胞质,主要聚集在核两侧,并与纺锤体微管蛋白共定位,即冻融过程改变了ERp57在卵母细胞的定位。穿卵实验结果表明冻融前后卵母细胞受精率和受精指数分别为89.1%和6.75±2.95(新鲜组n=110),75.9%和2.81±1.87(冻融组n=108),冻融卵母细胞受精率和受精指数较新鲜卵母细胞明显下降(p=0.008,p=0.000)。新鲜卵母细胞封闭ERp57前后受精率和受精指数分别为89.1%和6.75±2.95(空白对照组n=110),90.4%和6.26±3.53(正常IgG对照组n=115),75.7%和2.57±2.06(抗ERp57抗体封闭组n=103),抗ERp57抗体封闭组受精率和受精指数较对照组明显下降(p=0.004,p=0.000)。冻融卵母细胞封闭ERp57前后受精率和受精指数分别为75.9%和2.81±1.87(空白对照组n=108),74.6%和2.32±1.63(正常IgG对照组n=114),72.6%和2.37±1.72(抗ERp57抗体封闭组n=113),抗ERp57抗体封闭组受精率和受精指数较对照组无明显变化(p=0.847,p=0.389)。 结论:冻融过程可能改变了ERp57在卵母细胞的定位并影响其参与精卵融合的功能,降低了复苏卵母细胞的受精能力。