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目的:证明辣椒素(Capsaicin)通过抑制血管内皮生长因子(VEGF)的活性抑制基底动脉平滑肌细胞(BASMC)的增殖,并具有浓度依赖性。 方法:取SD大鼠断颈处死,无菌条件下取基底动脉,在显微镜下用镊子轻轻刮去血管内皮细胞后,将血管剪成碎块,用Ⅱ型胶原酶将其消化成絮状。用20%DMEM高糖培养液终止消化,离心机离心5分钟,取下层沉淀,用20%胎牛血清的DMEM重悬后放于含完全培养基的培养瓶中,在37℃含体积分数为5%CO2培养箱中培养,每3 d换液一次,培养一周待用。余下的实验分三步完成:第一步实验,按照实验分组,分别向96孔板中加入BASMC和不同浓度的辣椒素,过酶标法测定结果并记录数据;第二步实验,按照实验分组,分别向96孔板中加入BASMC和VEGF(10ng/ml)及不同浓度的辣椒素,最后通过噻唑蓝(MTT)实验观察BASMC的增殖情况,并记录数据;第三步实验通过VEGF活性检测试剂盒来完成,按照实验分组,分别向96孔板中加入VEGF(10ng/ml)和不同浓度的辣椒素,反应终止后通过酶标法测定不同浓度的辣椒素对VEGF(10ng/ml)活性的影响,并记录数据。 结果:研究发现,不同浓度的辣椒素对基底动脉平滑肌细胞的增殖无显著影响;VEGF能够促进基底动脉平滑肌细胞增殖;辣椒素能够通过抑制VEGF的活性,从而抑制BASMC的增殖,且具有浓度依赖性。在第二步实验中,浓度为1umol/l的辣椒素组与只加入VEGF(10ng/ml)的对照组相比P<0.05,浓度为10umol/l的辣椒素组与只加入VEGF(10ng/ml)的对照组相比P<0.01);第三步实验说明,辣椒素能够显著减低VEGF的活性,并具有浓度依赖性,浓度为0.1umol/l的辣椒素组与只加入VEGF(10ng/ml)的对照组相比P<0.05,浓度为1umol/l的辣椒素组与只加入VEGF(10ng/m1)的对照组相比P<0.01),均具有统计学意义。 结论:辣椒素通过抑制VEGF的活性抑制基底动脉平滑肌细胞的增殖,且具有浓度依赖性。