肾透明细胞癌患者血清低维生素D状态与肾IL-6/STAT3信号过度活化的相关性

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目的本研究目的是分析肾透明细胞癌(ccRCC)患者中血清25(OH)D水平与肾IL-6/STAT3信号激活之间的相关性,并检测ccRCC患者中不同的病理分级与IL-6/STAT3信号激活之间的关系。方法收集2013-2014年43名新诊断的ccRCC患者和86名年龄和性别与之相匹配的对照组人群。通过放射免疫测定法(RIA)测量血清25(OH)水平,通过酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中IL-6水平,通过蛋白免疫印迹法检测肾透明细胞癌组织及癌旁组织中STAT3、pSTAT3、PCNA和CyclinD1分子的表达量,并通过免疫组织化学法检测pSTAT3、Ki-67在组织切片中的表达情况。根据测得循环血清中25(OH)D水平将ccRCC患者组分为三组:VitD-S(≥30ng/ml)、VitD-I(≥20及<30ng/ml)和VitD-D(<20ng/ml)组。通过比较ccRCC患者组和对照组中血清25(OH)D水平与IL-6/STAT3信号激活之间的关联。此外,在ccRCC患者组的癌组织和癌旁组织中评估不同25(OH)D水平组与细胞增殖和STAT3信号激活之间的关系。最后,比较不同病理分级下STAT3信号水平的变化。在体外实验中,使用维生素D3预处理ACHN细胞系然后检测其是否能够抑制LPS诱导的STAT3磷酸化。结果ccRCC患者组血清IL-6水平较对照组明显升高,癌组织中的STAT3信号被激活。并且,ccRCC患者组血清25(OH)D水平与IL-6水平呈负相关(r=-0.616,P<0.01),而在对照组中则没有观察到上述现象(r=-0.046,P>0.05)。进一步分析显示,ccRCC患者中VitD-D组血清IL-6水平明显高于VitD-S/VitD-I患者组,同时,ccRCC患者中VitD-D患者组的pSTAT3水平高于VitD-S/VitD-I患者组。在ccRCC患者组,癌组织较癌旁组织中pSTAT3、PCNA、CyclinD1、Ki-67均高表达。进一步免疫组织化学分析中显示,与ccRCC患者中VitD-S/VitD-I组相比,VitD-D患者组中癌组织中pSTAT3~+核的数量显著增加。同时,蛋白免疫印迹及免疫组织化学染色显示在ccRCC患者组中,VitD-D患者组中的PCNA、Cyclin D1和Ki-67三种细胞增殖标志物的表达均显著高于VitD-S/VitD-I组。结论结果显示ccRCC患者组的血清IL-6水平较对照组升高,循环血清25(OH)D水平与IL-6水平呈负相关。此外,肾癌组织中STAT3信号在ccRCC患者的VitD-D组中被激活,并高于VitD-S/VitD-I的组。这些结果表明ccRCC患者组中血清低维生素D状态与活化的IL-6/STAT3有关,并且与PCNA、CyclinD1和Ki-67肿瘤增殖标志物的激活相关。
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