本文应用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术对单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)进行适体筛选,旨在筛选出能与该菌具有高亲和力特异性结合的DNA适体,为食品中单核增生李斯特氏菌的检测研究奠定一定的基础。本文在对单核增生李斯特氏菌的SELEX体外筛选过程中,利用反向筛选技术去除与单核增生李斯特氏菌存在的共同表位抗原,加快针对单核增生李斯特氏菌特异表位抗原适体的富集过程。经过14轮的筛选,对筛选产物进行克隆、测序,并对测序部分适体进行一级结构和二级结构的分析、结合率的测定以及特异性的研究。SELEX筛选结果表明,每轮的ssDNA富集文库与单核增生李斯特氏菌的结合率呈上升趋势,结合显色后吸光度值从第1轮的0.264上升到第14轮的0.659,提高了近2.5倍。一级结构保守序列显示有5对适体序列完全一致,另有部分适体序列只有一个碱基不同,而且CCC(TG)C(G)GGG(CA)这12个碱基在11个适体序列中都有,这说明一级结构同源性的适体有了一定程度的富集。二级结构模拟图以茎环状结构为主,说明这些茎环状结构是适体与靶分子进行结合作用的基础,也是其进一步形成三维空间结构的基础。适体与单核增生李斯特氏菌的结合实验表明,B09号适体的结合率最大,127号适体的结合率最小。B09号适体特异性实验显示,B09号适体与单核增生李斯特氏菌结合后的吸光度值最大,为0.760；说明B09号适体具有一定程度的特异性,为后续的应用研究奠定了一定的基础。