线粒体靶向肽SS31对H2O2诱导661W细胞程序性坏死的保护作用

来源 :西安医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lidongying
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨线粒体靶向肽SS31能否通过调控程序性坏死对抗H2O2引起的661W细胞损伤。方法选择400μmol·L-1 H2O2构建氧化应激损伤模型;根据MTT结果筛选出100nmol·L-11 SS31、50μmol·L-1 Nec-1作为实验最佳浓度。按661W细胞处理方式的不同,细胞分为空白组、H2O2组、SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组,用MTT法及LDH法检测细胞活性并在倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态结构变化;分别用双氯荧光素(DCFH-DA)染色和MitoSOX红色荧光染色分别在流式和荧光显微镜下检测各组活细胞线粒体中产生细胞活性氧簇(ROS)情况;用微量丙二醇(MDA)试剂盒检测测定氧化应激程度;JC-1染色测定线粒体膜电位;AnnexinV/PI双染检测细胞PI阳性率;用DAPI/PI染色双染在荧光显微镜观察细胞膜通透性变化;并应用Western blot法检测661W细胞反映程序性坏死的RIP3蛋白的水平。结果与对照组相比,H2O2组细胞存活率明显降低(P<0.05),SS31+Nec-1组、SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组细胞存活率均高于H2O2组,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜下MitoSOXTM染色结果显示,与H2O2组相比,SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组红色荧光明显减弱,流式细胞仪结果也进一步证实,SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组均能减少细胞内ROS量;SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组MDA水平均较H2O2组降低(P<0.05);与H2O2组相比,SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组线粒体膜电位细胞比例下降率升高,差异有统计学意义(P<0.05);AnnexinV/PI双染结果显示:与对照组相比,H2O2组PI阳性率增加;与H2O2组相比,SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组PI阳性率明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);Western blot检测结果显示,H2O2处理ARPE-19细胞9小时后,RIP3蛋白的表达开始升高,24小时RIP3蛋白表达水平最高(P<0.05)。与对照组相比,H2O2组RIP3蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),与H2O2组相比,SS31+H2O2组、SS31+Nec-1+H2O2组、Nec-1+H2O2组RIP3蛋白表达上调作用显著减弱,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论线粒体靶向肽SS31可部分通过抑制程序性坏死保护661W细胞,对抗氧化应激引起的损伤。
其他文献
目的:观察奥扎格雷钠治疗脑血栓形成的临床疗效。方法:对符合诊断标准的72例患者随机分成两组,每组36例,于治疗前后应用爱丁堡+斯堪的那维亚评分法进行评分。结果:治疗组和对照组总
发酵床养猪技术是近年来在我国兴起的一种环保型养殖新技术。其核心就是利用周围自然环境的生物资源.采集土壤中的土著微生物菌落。经过对这些微生物进行培养、扩繁。形成有相
围绕培养学生创造能力这一总目标,不断改革教学方法、内容和课程教学体系,并建立一套实验教学模式。为此,对实验教学进行总体设计,并分阶段完成这一总体目标。
<正> 在全国各条战线都以经济建设为中心,加速改革开放,社会主义市场经济逐步形成的新形势下,我国高等院校在为国家培养高级专门人才的同时,已经成为我国科研工作的重要方面
对我院2005年8月至2007年10月共38例80岁以上的高龄患病老人的临终观察,准确摸清临终老人不同病因、病情以及心理特征,采取有针对性的、科学的、人性化的护理,给临终老人安祥的
改革开放40年,中国的经济社会发展取得了举世瞩目成就。与此同时,随着工业化、城市化的快速推进,城市面临的水环境问题日益突出,成为影响城市可持续发展和我国城镇化进程的障碍,亟需采取有效措施加以治理。本文从多中心治理理论的视角,以台州市路桥区的水环境治理为例,介绍了该区水环境的基本情况及前期治理情况,综合运用文献研究、系统分析、实证研究等方法,全面分析了当前路桥区水环境治理工作存在的主要问题及其原因,
期刊
本文分析电子技术实验教学过程中的一些具体问题,总结了如何培养学生创新能力教学改革实践的经验,并提出进一步改革的设想.
从浙江绍兴鉴湖附近土样中分离筛选到1株产阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase,FAE)的菌株FD-8,通过菌落形态、分生孢子梗形态对比和ITS/18S rDNA分子生物学同源性分析,鉴定该
现代社会,随着以人为本的管理理念逐步深化,越来越多的企业开始将绩效管理理论运用至公司的实际管理中。一套完善的绩效管理体系可以有效提升企业内部个体与组织的绩效,极大地提高员工满意度并调动员工的工作积极性,从而顺利地推进企业战略的实现。本文主要根据炼糖行业的生产特点,以A糖业公司为例,建立了绩效管理机构。明确了组织目标分解流程,用制度的方式,对组织目标的分析进行了固化,确保指标分解的有效性和可行性。建