低分子肝素(low-molecular-weight heparin, LMWH,平均Mr3000-7000)是由未分级肝素(unfractionated heparin, UFH)经物理分级得到的具有较低分子量的组分或经化学方法或酶法降解得到的低分子量片段,具有与UFH相同的母体结构,是一种高度硫酸化的糖胺聚糖。与普通肝素相比,具有更低的出血副作用、更可预见的药理作用、更长的半衰期和更高皮下注射生物利用度,因而受到更多的关注,是近三十年发展起来的新一代肝素类抗血栓药物,目前已逐步取代肝素应用于临床。依诺肝素钠是肝素经碱性p-消除反应制得的低分子肝素片段,是低分子肝素的一种,其系统化学名为2-硫酸基-a-L-艾杜糖醛酸-p-(1→4)-2-去氧-2-N-硫酸基-6-O-α-D-葡萄糖,其非还原末端为4-烯基-吡哺糖-葡萄醛酸内酯,还原端有15%-25%的成分含有1,6-酐环状结构。平均分子量为3800-5000,小于2000含量为12.0%-20.0%,2000～8000含量为68.0%-82.0%。抗FXa活性为90IU/mg～125IU/mg,抗FⅡa活性为20IU/mg～35IU/mg,抗FXa/抗FⅡa为3.3～5.3。硫酸根与羧基比不小于1.8。依诺肝素钠的专利在2012年2月到期,在其独占市场的17年间取得了巨大的成功,为超级重磅炸弹药物。原料药的稳定性是指其保持物理、化学、生物学和微生物学特性的能力。稳定性研究是基于对原料药及其生产工艺的系统研究和理解,通过设计试验获得原料药的质量特性在各种环境因素(如温度、湿度、光线照射等)的影响下随时间变化的规律,并据此为药品的处方、工艺、包装、贮藏条件和复验期/有效期的确定提供支持性信息。本课题即开展国产仿制依诺肝素钠稳定性的研究,取得的主要成果如下1分析方法的建立与验证本课题中部分分析方法参考了欧洲药典中关于依诺肝素钠和低分子肝素项下的方法,另有部分有自建方法或对药典方法进行优化。课题中分别对分子量分析方法,抗Xa因子活性、抗Ⅱa因子活性分析方法,游离根离子分析方法,高效毛细管电泳(CE)分析方法和1,6-酐环状结构分析方法进行了验证。2稳定性研究依据化学药物(原料药和制剂)稳定性研究技术指导原则设计方案,开展了包括强降解试验、影响因素试验、加速稳定性试验和长期稳定性试验。强降解试验表明依诺肝素钠对强酸、强碱及强氧化较为敏感,其主要的反应为糖苷键断裂(分子量降低)、脱硫酸基、活性下降、光吸收增加；肝素结构中的O-硫酸基对碱性条件敏感,会脱落。即依诺肝素钠主要的降解反应为糖苷键断裂、硫酸基脱落。影响因素试验表明依诺肝素钠能够短暂承受光照,但应尽量避免；对于高温,则应避免,以免样品性状发生改变,影响产品质量。加速和长期稳定性试验表明依诺肝素钠在有效期内产品质量非常稳定,同时也证明了包材对药物保护的有效性。但考虑到第四年的吸潮现象,产品不宜过期存放和使用。通过对上述几方面的研究,初步确定了依诺肝素钠原料药的贮存条件和货架寿命,对国内本品种的质量标准的制定有参考意义。