【摘 要】
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目的:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）引起心肌损害的重要病理机制是慢性间歇性缺氧（CIH）。TRPC5通道是一种非选择性的阳离子通道,其激活可导致Ca2+内流,引起膜去极化和胞质Ca2+浓度升高。在这项研究中我们使用慢性间歇性缺氧（CIH）模型来模拟OSAHS,研究TRPC5通道在心肌损伤中的作用。方法:将20只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为NC组和CIH组。共8周的时间
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目的:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）引起心肌损害的重要病理机制是慢性间歇性缺氧（CIH）。TRPC5通道是一种非选择性的阳离子通道,其激活可导致Ca2+内流,引起膜去极化和胞质Ca2+浓度升高。在这项研究中我们使用慢性间歇性缺氧（CIH）模型来模拟OSAHS,研究TRPC5通道在心肌损伤中的作用。方法:将20只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为NC组和CIH组。共8周的时间,将大鼠放于常氧或间歇性缺氧,每天8小时。通过超声心动图、透射电镜、HE染色、TUNEL观察大鼠心脏结构、功能及病理的变化;流式细胞仪检测心肌组织ROS及钙离子的水平;实时荧光定量PCR和Western blot分析caspase3、TRPC5、PPP3CA、p NFATc1、p NFATc4、NFATc1、NFATc4 m RNA和蛋白的表达。结果:（1）经过8周的慢性间歇性缺氧处理后,CIH组大鼠LVIDs较NC组明显增大[2.881±0.124mm与2.529±0.256mm],P=0.003;CIH组大鼠ESV较NC组显著增加[0.063±0.008ml与0.044±0.013ml],P=0.004;CIH组大鼠LVEF、LVFS较NC组显著下降[0.837±0.024（%）与0.880±0.034（%）],P=0.011;[0.471±0.026（%）与0.526±0.044（%）],P=0.009。（2）透射电镜:NC组肌丝排列规则,肌节清楚,线粒体形态正常;CIH组肌节长短不一、部分肌丝溶解、细胞基质溶解,线粒体广泛致密样变。HE染色:NC组心肌细胞排列、细胞核形态及染色正常;CIH组心肌细胞肿胀呈颗粒变性,部分心肌纤维断裂、排列紊乱,大部分细胞核空泡状、淡染。TUNEL:CIH组心肌细胞凋亡率较NC组明显增高[41.875±21.034（%）与14.625±16.062（%）],P=0.011。同时检测大鼠心肌组织凋亡相关蛋白Caspase-3 m RNA及蛋白表达水平显示,CIH组较NC组明显增高（P＜0.05）,差异有统计学意义。（3）流式细胞仪检测大鼠心肌组织活性氧及钙离子水平显示,CIH组较NC组明显增高（P＜0.05）,差异有统计学意义。（4）CIH组大鼠心肌细胞TRPC5、PPP3CA、NFATc1、NFATc4 m RNA表达较NC组明显增高（P＜0.05）,差异具有统计学意义。CIH组大鼠心肌细胞TRPC5、PPP3CA蛋白表达较NC组明显增高（P＜0.05）,差异具有统计学意义;而NFATc1、NFATc4蛋白表达差异无统计学意义。CIH组p-NFATc1及p-NFATc4蛋白表达较NC组显著降低（P＜0.05）,差异有统计学意义。结论:（1）慢性间歇性缺氧引起OSAHS大鼠左心室收缩功能有所下降。（2）慢性间歇性缺氧引起OSAHS大鼠心肌细胞形态及超微结构的改变和凋亡的加重,从而导致心肌损伤。（3）慢性间歇性缺氧引起OSAHS大鼠心肌组织活性氧及钙离子浓度增高,从而参与心肌损伤。（4）OSAHS大鼠通过慢性间歇性低氧使心肌细胞TRPC5表达增多,进而引起Ca N表达增多、p NFATc1和p NFATc4水平降低,促进心肌细胞损伤。
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