【摘 要】
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目的:本研究通过检测病例组口腔鳞状细胞癌（Oral squamous cell carcinoma,OSCC）患者及健康对照者口腔环境中幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染率、两组人群细胞毒素相关蛋白A（Cytotoxin-associated protein A,CagA）、空泡毒素蛋白A（Vacuolar toxin associated protein A,Vac
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目的:本研究通过检测病例组口腔鳞状细胞癌（Oral squamous cell carcinoma,OSCC）患者及健康对照者口腔环境中幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染率、两组人群细胞毒素相关蛋白A（Cytotoxin-associated protein A,CagA）、空泡毒素蛋白A（Vacuolar toxin associated protein A,Vac A）血清抗体浓度、白介素8（Interleukin 8,IL-8）血清表达水平及相关基因位点遗传变异情况,探索HP感染是否与OSCC疾病发生存在关联,分析HP是否通过相关毒力因子的释放参与OSCC疾病进展,了解HP相关炎症信号遗传变异是否影响OSCC疾病进展,为OSCC的疾病防治提供相关理论及科学依据。方法:1.选取2020年3月至2021年10月在十堰市太和医院口腔颌面外科就诊的OSCC肿瘤患者共60例为病例组,选取同时间段年龄性别均匹配的外伤患者或健康志愿者共60例为对照组,所有研究对象采集口腔拭子及静脉血5ML。2.采用离心柱法提取所有研究对象口腔拭子全基因组DNA,设置HP特异性-ure A引物,采用聚合酶链反应（Polymerase chain reactions,PCR）检测两组样本口腔环境HP感染情况,了解HP感染在两组人群中的差异。3.采用酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测两组HP感染阳性样本CagA、Vac A及IL-8血清抗体浓度,比较病例对照组样本CagA、Vac A及IL-8血清抗体浓度差异,同时将病例组样本根据病理分化程度进行分组,比较病例组不同病理分化程度的样本CagA、Vac A及IL-8血清抗体浓度差异。分析HP感染是否通过毒力及炎症因子释放参与OSCC疾病进展。4.使用PCR扩增IL-8特异性遗传位点-251A/T（rs4073）目标基因片段,所得产物直接测序,统计两组人群IL-8-251A/T（rs4073）位点遗传变异情况,同时根据样本基因型进行分组,分析IL-8-251A/T（rs4073）位点多态性是否与OSCC疾病进展及血清IL-8表达相关。结果:1.PCR结果显示在病例组60名OSCC患者中口腔环境HP阳性样本数31例（51.67%）,HP阴性样本数29例（48.33%）。在对照组中HP阳性样本数19例（31.67%）,HP阴性样本数41例（68.33%）。两组样本HP感染率差异具有统计学意义（P＜0.05）同时在男性及吸烟群体中HP感染率更高。2.ELISA结果显示两组HP感染阳性样本CagA及IL-8血清抗体浓度存在显著性差异（P＜0.05）,病例组HP感染阳性样本CagA及IL-8血清抗体浓度明显高于对照组。两组Vac A血清抗体浓度未出现显著性差异（P＞0.05）。病例组样本按照病理分化程度的组内分析CagA、Vac A及IL-8血清抗体浓度差异不具备统计学意义（P＞0.05）。3.IL-8-251A/T（rs4073）位点测序结果显示,TT基因型携带者较AA基因型携带者、TT基因型携带者较AA+AT基因型携带者、AT+TT基因型携带者较AA基因型携带者以及T等位基因型携带者OSCC发病风险显著增加（P＜0.05）,同时在男性、年龄≥60岁、吸烟及饮酒群体中OSCC发病倾向可能升高。病例组及对照组组内基因型分析结果暂未发现rs4073位点遗传变异与OSCC患者血清IL-8表达存在相关性（P＞0.05）。结论:1.口腔HP感染与OSCC疾病相关。2.HP可能通过释放CagA毒力因子参与OSCC疾病进程,并诱导OSCC疾病相关炎症反应。3.IL-8基因多态性与OSCC疾病易感性相关,在吸烟及饮酒的协同作用下将增加OSCC发病风险。
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