【摘 要】
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目的:本实验通过检测HELA细胞IL-1lRα表达情况,构建IL-11类似物环九肽c(CGRRAGGSC)标记探针,探讨其在荷瘤裸鼠模型中靶向IL-11Rα显像特异性,为人宫颈癌的诊断及治疗提供一
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目的:本实验通过检测HELA细胞IL-1lRα表达情况,构建IL-11类似物环九肽c(CGRRAGGSC)标记探针,探讨其在荷瘤裸鼠模型中靶向IL-11Rα显像特异性,为人宫颈癌的诊断及治疗提供一种新的有效途径和方法。方法:(1)通过Western Blot方法检测宫颈癌HELA细胞系和人正常宫颈上皮细胞系HCerEpic中的IL-11R α的表达情况,并用FITC化学标记c(CGRRAGGSC)进行细胞免疫荧光实验,检测其与HELA细胞体外结合特异性;制备近红外标记探针Cy7-c(CGRRAGGSC),经尾静脉注射并于不同时间点行近红外活体成像,探讨其体内靶向结合特异性;(2)在氯化亚锡缓冲盐溶液中对环九肽进行99Tcm标记,制备放射性核素探针99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC),并对其标记率、放射化学纯度、体外稳定性及生物相容性进行检测;(3)尾静脉注射标记探针99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC),检测该探针在模型鼠体内生物分布情况;(4)通过瘤体间质注射1.82MBq99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC)及游离99TcmO4-,于不同时间点行SPECT显像。结果:(1)Western Blot结果表明HELA细胞明显表达IL-11R α蛋白,而在HCerEpic细胞中极少表达;体外细胞结合实验证明FITC-c(CGRRAGGSC)能够特异性与HELA细胞的胞质和胞膜结合;活体近红外显像结果表明近红外标记探针长时间聚集于肿瘤部位,标记化合物体内靶向显影好。(2)放射性核素标记探针99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC)即时标记率达96.62%,将其分别置于常温和人新鲜血清37℃下孵育,12h放化纯度仍可达90%左右,表明其标记率高,体外稳定性好,与血清生物相容性佳。(3)核素标记产物在荷瘤裸鼠体内分布实验结果说明局部肿瘤组织对99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC)有持续较高的摄取率,肿瘤清除较缓慢,在体内主要经肾脏膀胱代谢,部分经肝脏清除,余脏器则分布较少。(4)99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC)经瘤体注射后,见肿瘤局部即刻浓聚,且保持较长时间;而瘤体间质内注射游离99Tcm04-后约0.5h即见放射性几乎消退;表明该核素标记化合物对肿瘤组织具有良好的滞留性。结论:宫颈癌HELA细胞高表达IL-11Rα,受体蛋白主要位于细胞的胞质及胞膜上;成功制备出核素标记探针99Tcm-DTPA-c(CGRRAGGSC)在本实验中起着关键作用,它们具有稳定性高,靶向特异性好,代谢途径佳等优良特性,为标记探针在高表达IL-11Rα的宫颈癌模型体内分布及显像研究提供科学基础,核素显像及近红外显像结果表明标记探针与IL-11Rα结合具有高度靶向特异性,c(CGRRAGGSC)将有望用于由临床上表达IL-11R α介导的肿瘤早期特异诊断及靶向治疗研究。
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