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目的:探讨扶阳益阴、化瘀解毒方联合多西他赛化疗治疗去势抵抗性前列腺癌(castrate-resistant prostate cancer,CRPC)的临床疗效,研究该复方诱导前列腺癌细胞凋亡的相关分子机制。方法:(1)临床观察部分:共纳入CRPC患者54例,所有患者均予全雄激素阻断治疗(每日口服比卡鲁胺50mg,每4周皮下注射戈舍瑞林3.6mg)作为基础治疗。随机分为治疗组和对照组。治疗组予扶阳益阴、化瘀解毒方,联合多西他赛静脉化疗(每3周静脉滴注多西他赛75mg/m2+口服泼尼松5mg,早晚各1次);对照组予多西他赛化疗(每3周静脉滴注多西他赛75mg/m2+口服泼尼松5mg,早晚各1次),疗程均为24周。观察两组患者治疗前、治疗12周、24周后血清前列腺特异性抗原(PSA)、体力状况(Kamosky评分)、生活质量(FACT-P)及中医症状评分的变化,并收集实验室相关指标:PSA、血清睾酮(T)、白细胞计数、血红蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐。数据采用SPASS 19.0软件统计分析,计量资料分析样本均数比较用t检验,计数资料分析用卡方检验。(2)实验部分:本实验选取前列腺正常细胞WPMY-1、雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP和雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3为研究对象,分别运用不同浓度(0、2、5、10mg/ml)的扶阳益阴、化瘀解毒方培养细胞。通过形态学观察前列腺正常细胞和前列腺癌细胞形态,运用CCK-8法测定前列腺癌细胞的存活能力,采用DAPI染色法测定细胞核凝缩破裂,运用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术测定前列腺癌细胞的凋亡率。然后通过PI单染流式细胞术测定前列腺癌细胞的周期变化。最后采用蛋白免疫印迹法检测PI3K/Akt/FoxO1通路上相关磷酸化位点的磷酸化水平,以及其下游凋亡相关蛋白和周期相关蛋白的表达。结果:(1)临床观察部分:治疗12周后,对照组与治疗组的血清PSA值分别由治疗前的25.9±39.3ng/ml、22.1±33.9ng/ml 下降至 20.0±21.1ng/ml、17.9±19.1ng/ml,两组较治疗前均有统计学差异(P<0.05),两组间相比无统计学差异(P>0.05)。治疗24周后,对照组与治疗组血清PSA较治疗3个月后分别小幅上升至23.1±28.4ng/ml、19.6±23.5ng/ml,但均无统计学差异(P>0.05)。治疗组在治疗12周后体力状况、生活质量、中医症状评分均得到改善,较治疗前均有统计学差异(P<0.05),治疗24周时较治疗12周时保持稳定;但对照组治疗12周、24周后体力状况、生活质量、中医症状评分均无明显改善。(2)实验部分:扶阳益阴、化瘀解毒方使前列腺癌细胞周期阻滞在G1期,并呈浓度依赖性降低细胞的存活能力、增加细胞核凝缩破裂以及核小体的形成,显著提高前列腺癌细胞的凋亡率。在分子机制上,扶阳益阴、化瘀解毒方呈现浓度依赖性下调PI3K/Akt活性,降低FoxO1磷酸化水平,进而上调FoxO1的转录活性,最终影响凋亡相关基因和周期相关基因的表达。结论:(1)临床观察部分:扶阳益阴、化瘀解毒方联合多西他赛化疗治疗CRPC,可显著提高患者生活质量,提高Karnofsky评分,改善患者身体状况和情感状况,改善患者乏力、失眠、排尿困难、便秘、水肿等症状,并且扶阳益阴、化瘀解毒方对患者血常规、肝肾功能均没有负面影响,表明该中药复方汤剂对CRPC患者有一定疗效,安全可靠,适合临床推广。(2)实验部分:扶阳益阴、化瘀解毒方对前列腺癌细胞的生长具有显著的抑制作用,其可能的作用机制为,通过PI3K/Akt/Fox01信号通路诱导前列腺癌细胞周期阻滞并发生凋亡,为临床前列腺癌的治疗提供了一定的理论依据。