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目的:
利用分枝杆菌液体培养法联合PCR菌种鉴定技术以了解目前华北地区HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的情况,同时分析HIV/AIDS患者结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌感染的构成比,以期为临床诊断与治疗提供病原学依据,并对合并分枝杆菌感染的HIV/AIDS患者的临床表现、影像学检查结果和相关实验室检查结果等资料进行分析总结。
方法
对2009年3月至20lO年3月收治的12l例AIDS患者进行分枝杆菌合并感染的筛查,临床疑似病例应符合下述项目至少一项:1、发热;2、体重减轻;3、影像学异常。利用BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌培养仪及配套MGIT分枝杆菌生长指示培养管和BACTEC 9120血培养仪配合BACTEC Myco/F Lytic培养基对筛选出的53例疑似合并分枝杆菌感染患者的可疑感染部位标本(共计101份)进行分枝杆菌培养,其中包括50份外周血标本及51份非外周血标本。
所有非外周血标本经前处理后,先行抗酸染色之后接种至MGIT分枝杆菌生长指示培养管,随后置入BACTEC MGIT 960培养仪。外周血标本经无菌采集直接接种至BACTEC Myco/F Lytic培养基,随后置入BACTEC 9120血培养仪进行培养。所有仪器报阳标本经抗酸染色证实为抗酸杆菌生长后,取少量培养液进行PCR菌种鉴定,所采用的三对特异性引物分别用于扩增分枝杆菌属特异性的hsp65蛋白基因(440bp)、结核分枝杆菌的IS6110基因(246bp)和鸟胞内分枝杆菌复合体的IS1245基因(427bp)。
HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的病原学确诊依据为分枝杆菌培养阳性和/或抗酸染色阳性。最后,收集所有经确诊合并分枝杆菌感染的HIV/AIDS患者的临床资料、影像学检查结果及相关实验室检查结果进行分析与总结。
结果
53例疑似合并分枝杆菌感染患者中,经病原学证实存在分枝杆菌感染的患者为19例(35.8%),占同期住院患者的19/121(15.7%),这19例患者均为分枝杆菌培养阳性,仅3例患者存在初始标本抗酸染色阳性,未发现涂片阳性培养阴性者。19例患者中有11例(57.9%)为肺脏累及,2例(10.5%)为肺外累及,4例(21.1%)为分枝杆菌血症,2例(10.5%)为肺脏累及和分枝杆菌血症并存。经PCR菌种鉴定,16例(84.2%)为结核分枝杆菌,3例(15.8%)为鸟胞内分枝杆菌复合体。19例确诊患者的临床表现主要以发热和体重减轻为主,同时伴有血沉增快,其中78.9%的患者CD4+T细胞计数<100个/μL,大部分患者在发现分枝杆菌感染之前未采用抗病毒治疗及预防性的异烟肼治疗。值得注意的是,19例确诊患者中仅9例有明确的影像学异常,说明实验室培养对HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的诊断起着不可替代的作用。
结论
HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的状况严重,其中以结核分枝杆菌感染为主,亦有少量非结核分枝杆菌感染的发生。由于HIV/AIDS患者免疫系统严重受损,致使分枝杆菌感染的临床表现及影像学表现均不典型,单靠临床与影像学手段易造成漏诊、误诊。故需要临床医生在实际工作中加大筛查力度,并加强临床与实验室的相互配合。联合应用BACTEC MGIT 960等分枝杆菌液体培养手段和PCR菌种鉴定技术可以提高分枝杆菌感染检出的阳性率并达到菌种快速鉴定的目的。