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近年来,多种血液疾病的发病率和死亡率呈现上升趋势。目前,临床上会使用造血细胞移植的方法来治疗多种血液疾病,但单份骨髓和脐带血中的造血细胞数量有限,难以满足临床需求,而且,所使用的治疗血液疾病的药物,大都具有一定的副作用。因此,本课题选用安全性高、无毒副作用的微藻源活性肽HP-6对造血细胞进行功效与机理研究,同时对HP-6进行体内非临床药代动力学研究。首先,选取健康Wistar大鼠,利用骨髓淋巴细胞分离液从大鼠骨髓中分离出造血细胞,并对造血细胞进行体外培养。接着将HP-6制备成0.0001mg/mL,0.001mg/mL,0.01mg/mL,0.1mg/mL,1mg/mL五个浓度梯度,在体外对造血细胞培养24h和48h,然后以磷酸盐缓冲液(PBS)为对照,用噻唑蓝(MTT)检测造血细胞在给药24h和48h后的增殖率。实验结果表明,五个浓度梯度都可促进造血细胞的增殖,并且随浓度的增加增殖率呈现先增后减的趋势,其中24 h的增殖效果好于48h,浓度为0.01mg/mL时的促增殖效果最好,达到了48.79%。第二,在基因水平上,通过半定量PCR和实时荧光定量PCR的方法,分析HP-6处理的造血细胞增殖调控因子Foxm1的表达量。半定量PCR结果发现,用不同浓度的HP-6处理造血细胞后,Foxm1基因的表达量有所提高。为了更准确的了解HP-6对Foxm1基因表达量的影响,进行了实时荧光定量PCR,其结果显示不同浓度的HP-6可提高Foxm1基因的表达量,当活性肽浓度为0.01 mg/mL时,Foxm1基因的表达量是对照组(PBS)的1.76倍。因此,HP-6可以通过调节Foxm1基因的水平来促进造血细胞的增殖。第三,对HP-6进行非临床药代动力学研究。大鼠经腹腔注射10.0mg/kg活性肽HP-6,在1h、4h和24h后,利用高效液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)检测HP-6在大鼠体内的组织分布情况;收集0-4h、4-8h、8-12h、12-24h、24-36 h、36-48h、48-72h时间段大鼠的排泄物,利用LC-MS检测大鼠排泄物中HP-6的排泄情况。结果表明,大鼠经腹腔注射10.0 mg/kg活性肽HP-6,在1 h、4h和24h后,大鼠的心、肝、脾、肺、肾、大肠、小肠、胃、脑、骨髓组织中检测到HP-6,其中在骨髓中的含量最多;另外,在大鼠粪便中检测到HP-6,其中在给药24-36h时间段,粪便中HP-6的排出量最多,排泄速率也最大。综上所述,本课题为以后实现HP-6的药用价值提供了一定的实验基础与理论依据。