美国红鱼学名眼斑拟石首鱼(Sciaenops ocelcatus)属鲈形目、石首鱼科、拟石首鱼属,为浙江、福建主要养殖鱼类之一。近年来,随着养殖集约化发展,美国红鱼病害频繁爆发,严重制约着其人工养殖业的发展,产业的可持续发展急需对其病害进行免疫防治技术研究。本文分析了从患溃烂症的美国红鱼体内分离到的优势菌株M-1的致病性和分类学地位,并对培养条件进行了优化,进一步研究了用该菌制备的灭活疫苗对美国红鱼的免疫效果,最后又对中草药制剂对影响美国红鱼免疫的机能进行了探讨。获得的结果如下:1、从患溃烂症的美国红鱼分离到优势菌株M-1,人工感染实验证实该菌为美国红鱼的致病菌。对该细菌进行了形态学、生理生化特性分析,同时测定了菌株M-1的16S rRNA和HSP60基因序列,分析相关细菌相应序列的同源性,构建了系统发育树。16S rRNA基因构建的系统发育树显示,菌株M-1与灿烂弧菌(AJ874361)的亲缘关系最近,具有96.1%的同源性;HSP60基因序列分析表明M-1与弧菌(EU653883)聚为一个分支。综合上述结果,可鉴定菌株M-1为灿烂弧菌,命名为灿烂弧菌M-1菌株(Vibrio splendidus M-1)。药敏实验证实该菌株对菌必治、复方新诺明、先锋必等9种药物敏感。2、采用梯度法比较了培养时间、温度、盐度、初始pH值、菌液起始浓度等对灿烂弧菌M-1菌株生长的影响;采用正交试验法对Zobell 2216 E培养基组分进行了优化。结果表明:M-1菌株产最大活菌数的培养条件为:培养时间48 h、温度32℃、盐度40、初始pH值8.0、菌液起始浓度为1×105 CFU/mL;最佳培养基成分为:蛋白胨7.5 g/L、酵母浸出膏1.5 g/L、CuSO4 0.075 mg/L、CaCl2 0.04 g/L。3、制备灿烂弧菌福尔马林灭活疫苗。通过浸泡、注射和口服等3种方式接种美国红鱼,分别在接种免疫后第7、14、21、28、35 d采鱼血,检测其血清抗体效价、溶菌酶活力和白细胞吞噬活性;第28 d用1.0×108CFU/mL的灿烂弧菌菌悬液进行攻毒试验来比较疫苗的免疫效果。结果表明,各免疫组血清抗体效价在第21 d达到峰值,且浸泡组和注射组的血清抗体效价高于口服组;在35 d实验期内,各免疫组的血清溶菌酶活力有明显提高,各浸泡组和注射组于免疫接种后14 d显著高于对照组水平(P<0.05);除浸泡组3外,其余各免疫组的白细胞吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI)在免疫接种后14 d均较对照组有显著升高(P<0.05);各组受免鱼对人工攻毒均具有保护作用,注射组2的免疫保护率最高达77.8%。4、用分别含连翘、猪苓、黄芩、茯苓和黄连水提取物的配合饵料饲喂美国红鱼,研究其对美国红鱼生长和免疫机能的影响。结果表明:投喂含有黄芩和茯苓的药饵可使美国红鱼的体长增长率和相对增重率显著高于对照组(P<0.05);投喂5种含中草药的药饵后,美国红鱼血液白细胞的吞噬活性有明显提高,投药后3 d,除茯苓组外,其余各组吞噬百分比(PP)比对照组极显著升高(P<0.01);在投药后3 d或7 d,连翘、黄芩和黄连组的吞噬指数(PI)与对照组相比有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高。在停投药饵后7 d,除茯苓组外,其余各组PP、PI与对照组相比仍有显著差异(P<0.05)。同时,美国红鱼血清溶菌酶活性也有显著提高,投药后7 d,溶菌酶活性与对照组之间差异极显著(P<0.01),但在停投药饵后7 d,溶菌酶活性与对照组之间无显著差异(P>0.05);投药28 d后,利用哈维氏弧菌人工感染美国红鱼,黄芩组的相对免疫保护率最高,达88.9 %,连翘组次之,茯苓组最低。