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大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus, SMV)是一种在世界上很多国家广泛分布并极具破坏性的植物病毒,会导致大豆严重减产和种质衰退,每年都给很多国家带来巨大的经济损失,因此,建立一种快速检测SMV的方法对于检测和防控大豆花叶病毒的发生与流行是十分必要的。本研究建立了两种方法：一种为大豆花叶病毒一步免疫层析检测法,该方法利用胶体金标记单克隆抗体(mAb)检测植物样品中SMV。一种为逆转录环介导等温扩增(Reverse-transcription loop-mediated isothermal amplificatioi1)检测大豆叶片和种子中的SMV的方法,两种方法都实现了对SMV快速、准确的检测。SMV的免疫层析试纸条检测：本研究利用原核表达方法体外表达大豆花叶病毒的外壳蛋白,采用腹腔免疫方式免疫小鼠,通过细胞融合技术获得杂交瘤细胞株,成功制备4株SMV单克隆抗体。并采用双抗体夹心模式,使用两株不同特异性的单克隆抗体,制备免疫层析试纸条。一株抗SMV单抗(mAb3E12C6)被固定到在硝酸纤维素膜检测区域,而另一株抗SMV单抗(mAb4Bgn9)偶联到作为显色剂的胶体金粒子上。然后将植物样品溶液通过毛细管作用,与抗SMV IgG抗体在检测区发生反应,使SMV滞留在检测区域,从而出现红色阳性结果,检测方法快速方便,可在5分钟内出结果。制备的试纸条可以敏感且特异的检测到大豆叶子和种子中携带的SMV。SMV的RT-LAMP检测：本研究根据GenBank数据库中大豆花叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计并筛选到了SMV RT-LAMP特异性引物组,应用该引物组优化了RT-LAMP反应参数,灵敏度实验结果表明,RT-LAMP检测SMV比普通RT-PCR灵敏度高出10～100倍。结合RNA粗提法,建立了一步法RT-LAMP快速、灵敏地检测到植物叶片中的SMV。加入荧光染料SYBR Green I则可在反应管中直接观察检测结果,实现了检测的可视化。该RT-LAMP技术还可灵敏地检测到大豆种子中携带的SMV。在这项工作中,我们首次研制了一种简单、快速检测SMV的试纸条及将RT-LAMP检测方法应用于SMV的检测。这两种高特异性和高灵敏度且快速检测SMV的方法,可以直接应用于田间,具有很大的应用价值。