拟南芥AtSPX3基因的表达及功能研究

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在酵母里含有保守的SPX domain的众多蛋白中,其中很多都与磷代谢相关,包括磷水平感受器PHO81。在高等真核生物中,有许多功能未明确的蛋白含有该结构域,所以,对含有SPX domain基因的研究可以为进一步的磷信号途径研究提供线索。 本论文涉及拟南芥中SPX domain家族的一个基因,AtSPX3(At2g45130)。定量RT—PCR结果显示了该基因的表达模式:当缺磷5天时,根和叶中该基因受诱导表达;当正常供磷后该基因表达迅速回复正常,这就意味着AtSPX3基因响应于磷信号。AtSPX3基因的表达受缺磷诱导。用启动子与β-葡萄糖苷酸酶融合的方法来分析AtSPX3基因的启动子的活性发现主要在根中和叶有强烈表达,在花粉粒中也表达。GUS活性的表达和RT-PCR结果一致。拟南芥叶肉细胞原生质体的瞬间表达分析发现,AtSPX3与GFP(绿色荧光蛋白)的融合蛋白定位于叶绿体和前质体中。另外,缺磷条件下AtSPX3基因启动子驱动的GUS活性在phr1突变体中受到抑制,定量RT-PCR的结果也显示,缺磷条件下该基因在phr1突变体中的表达受到抑制,说明在磷信号的传递途径中,PHR1在AtSPX3的上游。AtSPX3基因的干涉株系在缺磷条件下显示了超敏感的表型,相关的磷饥饿特异诱导基因在干涉株系的地上部和地下部中的表达显示了不同的表达模式。本研究表明AtSPX3基因可能在PHR1的下游起作用,对于植物适应磷饥饿胁迫有重要的意义。
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