蛋清高F值寡肽的制备技术研究

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本课题采用内切酶和外切酶组成的双酶体系,分步水解新鲜鸡蛋蛋清,制备蛋清水解液,然后采用活性炭吸附分离芳香族氨基酸制备高F值寡肽,深入开发利用蛋清中的蛋白质。以蛋清蛋白作为高F值寡肽产品的制备原料,主要有如下优点:蛋白质含量高、种类丰富、生产成本较低等。酶法水解蛋清蛋白制备生物活性肽,不仅能够提高蛋清的经济价值和利用率,而且对蛋清高F值寡肽的工业化生产有着重要的作用和意义。主要研究结果如下:1.本试验以水解度为指标,采用pH-stat法对3种不同的内切蛋白酶进行筛选,确定出碱性蛋白酶为最佳内切用酶。通过对底物浓度、pH值、温度、加酶量等单因素的考察并采用正交试验设计优化水解工艺,得到碱性蛋白酶的最佳水解工艺参数为:底物浓度4%,pH值10,温度60℃,加酶量4%,酶解时间4h,水解度达41. 67%。2.采用甲醛滴定法,以游离氨基态氮含量为指标,考察2种不同的外切蛋白酶对经碱性蛋白酶酶解后的蛋清水解液的酶解效果,得出风味蛋白酶为最佳外切用酶。通过单因素试验和正交试验设计优化水解工艺,得出风味蛋白酶水解蛋清酶解液的最佳工艺参数为:pH值7.5,温度55℃,加酶量3%,酶解时间3.5h。3.蛋清经碱性蛋白酶和风味酶酶解后,然后进行高F化处理。本文采用活性炭吸附法分离去除蛋清水解液中的芳香族氨基酸,并脱色。选用3种不同型号的活性炭对蛋清水解液进行吸附,优选出粉状活性炭为最佳吸附剂。通过单因素试验和正交试验得出粉状活性炭吸附分离芳香族氨基酸的最佳工艺参数为:活性炭用量8%,pH值8.0,温度40℃,吸附时间1.5h。4.将试验制得的蛋清水解液进行冷冻干燥,获得产品,然后进行分子量测定,结果表明:蛋清肽的分子量在1000Dal以下,含量高达98.99%,主要集中在180-500Dal,占72.05%,F值达44.58。
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