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绵羊支原体肺炎又名绵羊传染性胸膜肺炎(Contagious ovipne pleuropneumonia),是由绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)引起的一种以发热、呼吸困难、咳嗽、流涕、渐进性消瘦及间质增生性肺炎为特征的慢性呼吸道疾病。该病主要在以养羊业为主的国家和地区流行,1982年我国首次在四川分离出MO,随后在内蒙古、新疆、青海、西藏等地均有该病的流行,给畜牧业造成较大的经济损失,成为严重威胁我国养羊业快速发展的重要病原之一。新疆是我国畜牧业大省,绵羊养殖业在新疆畜牧业中占有重要的地位,而绵羊支原体肺炎的病例时有发生。因此,开展绵羊支原体肺炎的流行病学调查,分析当地流行株的生物学特性,对该病的科学防控具有重要的意义。为了了解新疆沙湾县绵羊支原体肺炎病的感染和流行情况,本研究主要开展了新疆沙湾县绵羊支原体肺炎的流行病学调查,对MO流行株进行了分离鉴定及遗传变异分析,并开展了流行株部分生物学特性及药物敏感性研究。主要研究内容和结果如下:1、新疆沙湾县绵羊支原体肺炎流行病学调查通过血清学、病原学、现场及病理解剖等流行病学调查方法对沙湾县7个乡镇的18个羊场共27群绵羊进行绵羊肺炎支原体感染和流行调查。血清学调查结果显示,沙湾县7个乡镇绵羊肺炎支原体感染率在7.14-20.00%之间,平均感染率达11.92%;临床症状疑似病羊鼻拭子PCR检测结果显示,阳性率在58.33-77.78%之间,平均阳性率为66.27%,且不同品种的绵羊感染率存在较大差异,其中湖羊感染率可达85.71%,明显高于小尾寒羊(57.14%)和阿勒泰羊(48.15%)。发病季节集中在春季和冬季;绵羊发病年龄主要集中在0-3月龄,其临床疑似绵羊支原体肺炎所占比例可达68.57%。感染病羊主要表现为咳嗽、流鼻涕等呼吸道症状;病理剖检病死羊肺部呈肺炎病变,部分呈“肉变”样。流行病学调查结果证实,新疆沙湾县7个乡镇均存在不同程度的MO感染,其中博尔通古乡的感染最为严重。2、绵羊肺炎支原体沙湾流行株的分离鉴定及其遗传变异分析利用改良KM2培养基对疑似绵羊肺炎支原体感染的病死羊肺脏进行病原的分离鉴定,并通过分子生物学的方法对流行株的16S rRNA和P80抗原基因进行序列比对与遗传进化分析。结果成功分离出具有MO菌落典型特征的3个菌株。3个流行株16S rRNA基因序列与MO SC01株核苷酸同源性高达99.35-99.68%;遗传进化树显示该流行株与MO SC01株的亲缘关系最近,证实分离的菌株为MO。流行株P80抗原基因序列与GenBank中已知的MO法国14811株膜蛋白P80基因序列相比,核苷酸同源性为97.11%,推导氨基酸序列的同源性达98.28%。与MO法国14811株相比,该基因存在60处碱基差异,其中24处是同义突变,36处为错义突变,导致12个氨基酸发生了改变,表明MO沙湾流行株与其他地域流行株存在一定的遗传变异。3、绵羊肺炎支原体流行株部分生物学特性及药物敏感性研究通过生化反应、生物膜观察及药物敏感性测定等对分离出的3个MO流行株进行了部分生物学特性的研究。结果显示3个MO流行株可发酵葡萄糖,并可被美兰着色;3个流行株在培养60h后染色均可产生稀疏的生物膜,但不能形成明显的网状结构。通过16种药物进行敏感性测定结果表明,3株均对盐酸环丙沙星、氧氟沙星和阿奇霉素高度敏感,MIC分别为0.013-0.026、0.0195-0.026、0.016-0.026μg/mL;对氟苯尼考、恩诺沙星、莫西沙星盐酸盐、盐酸四环素、盐酸林可霉素、克拉霉素中度敏感,MIC分别为0.104-0.208、0.065-0.130、0.104-0.156、0.065-0.104、0.365-0.417、0.417-0.521μg/mL;对盐酸土霉素、盐酸强力霉素、红霉素、米诺环素、庆大霉素低度敏感,MIC分别为1.042-1.667、0.833-1.458、1.042-1.667、1.25-2.083、2.083-3.3331μg/m L;卡那霉素不敏感;SW-3株对泰乐菌素低度敏感(MIC为1.458μg/mL),其余2株高度敏感(MIC均为0.046μg/m L)。将泰乐菌素低敏株与高敏株进行23S rRNA基因突变相关性分析,泰乐菌素低敏株与高敏株相比,23S rRNA基因20个位点存在差异,其中第559位由T-C,753位G-A,1084位T-C,1358位A-G,1381位A-G,1645位T-C,1652位C-T,1653位T-C,1689位C-T,1695位A-C,1696位T-A,1697位A-G,1761位T-C,1817位T-C,1914位T-C,2123位G-A,2628位G-A,2629位T-C,2789位G-T,2830位C-T等碱基发生改变,推测这些位点的差异可能与不同流行株对泰乐菌素敏感性差异相关。本研究开展了沙湾县绵羊支原体肺炎流行病学调查,同时对沙湾流行株16S rRNA基因与P80抗原基因进行了遗传进化分析,并对分离株部分生物学特性进行了研究,为沙湾县该病的有效防控提供了流行病学资料。