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SREBP1家族蛋白在机体内应答于sterol信号的激活,对脂的合成以及代谢有很重要的调控作用。SREBP1c作为肝脏中SREBP1的主要存在亚型,控制着各种脂肪酸合成酶的转录活性。胰岛素通过LXR-RXR二聚体激活SREBP1c的转录,使其mRNA增加,并通过SREBPlc调节下游脂肪合成酶的活性,从而达到肝脏多余糖向脂肪的转化。Cidea基因是cell death inducing factor DFFA like effecter家族成员之一。最初发现时,因其N末端与DFFA的高同源性命名。家族的三个成员中cideb在各组织的表达水平基本一致,cidea主要存在于棕色脂肪组织,在白色脂肪以及脑,乳腺中表达较高。而cidec主要表达于白色及棕色脂肪组织。文献报道cidea敲除小鼠对膳食导致的肥胖不敏感,并且在人体内,cidea基因与脂滴的生成以及胰岛素敏感性相关。在SREBP1a转基因小鼠的肝脏表达谱芯片结果中显示,cidea的mRNA有明显增加,因此我们假设cidea作为SREBP1的靶基因,在肝脏脂肪合成及代谢,胰岛素效应通路中具有相关调节功能。在小鼠肝原代细胞中,腺病毒介导的SREBP1a和1c过表达均可使cidea的mRNA水平升高600倍左右,蛋白水平也有显著的提高。利用应用软件对cidea基因的上游启动子-1000bp进行分析,发现在-134bp到-118bp之间有与SREBP1结合元件SRE和E-box保守序列高度同源的串联结构序列。随后利用Dual-Luciferase Reporter Assay System对cidea的启动进行的激活实验表明软件分析得到的SREBP1结合元件确实为SREBP1a,以及1c的结合作用部位,利用点突变将该位点突变之后,SREBP1a,1c对cidea启动子的激活作用即消失。染色质免疫共沉淀实验和EMSA实验分别在体内,体外进一步证实了SREBP1与cidea启动子预测位点的结合。做为胰岛素下游的靶基因,SREBP1c的表达受到胰岛素信号的调节,胰岛素通过LXR-RXR作用于SREBP1c启动子直接激活SREBP1c的转录,而对cidea基因的上调作用是通过SREBP1c介导完成的。胰岛素刺激肝原代细胞72小时之后检测,结果得到cidea的mRNA上调4.48±1.02倍左右,LXR激动剂T0901317刺激肝原代细胞72小时后cidea的mRNA水平亦有4.59±0.40倍的上调。蛋白水平的结果与mRNA相一致。此外,在SREBP1c敲除小鼠的肝原代细胞中,给予相同的胰岛素和T0901317刺激未观察到cidea mRNA以及蛋白水平的改变。证实了胰岛素对cidea的上调作用是通过SREBP1c介导的。通过油红染色检测证明cidea对肝细胞中脂肪的积累具有促进作用。腺病毒介导的肝原代细胞cidea过表达48小时之后,使用油红染色可观察到细胞中脂滴的增大。siRNA干扰cidea后,过表达SREBP1c的肝细胞与正常细胞SREBPlc过表达相比,脂滴的生成量有部分降低,表明cidea在SREBP1c对细胞脂肪积累起到一定作用。Cidea可以与SREBP1的前体蛋白结合,在细胞质中免疫荧光结果显示两种蛋白可以共定位,由此推断cidea可能影响SREBP1的成熟。cidea与SREBP1c的前体形式蛋白在Hela细胞中共同过表达后,可发现SREBPlc前体蛋白在细胞浆的含量减少,而成熟蛋白增高,同时细胞核内成熟蛋白形式也有所增加。此外在肝原代细胞中过表达cidea后SREBP1c下游基因ACC及FAS的mRNA有轻微上调。综合以上结果,可以得出以下结论：SREBPla, lc通过直接结合于cidea的启动子行使对cidea基因的表达调控,并直接介导了胰岛素对cidea的上调作用。在肝脏细胞中,以及脂肪细胞中,cidea能够刺激细胞浆脂滴的增长,并且在SREBP1c调控的脂肪合成中具有部分作用。这一结果暗示cidea基因在2型糖尿病由于胰岛素抵抗而引起的肥胖机制中以及在脂肪肝的形成中具有重要意义。PPARy是脂肪细胞内控制脂肪生成和细胞分化的重要转录因子。PPARy与其转录共激活因子PGCla可共激活cidec的转录。在分化的脂肪细胞中,PPARy的激动剂pioglitazone可以刺激细胞内cidec的表达,并且在分化的脂肪细胞中,过表达cidec可以促进细胞甘油三酯的积累。