绿竹实生苗耐盐性研究及DNA条形码对竹子的聚类分析

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aquarius215
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本文研究了绿竹实生苗叶片中的生长状况、组织含水量、渗透调节物质含量变化和保护酶活性变化。通过测定绿竹实生苗在NaCl胁迫下生长状况与生理生化指标的变化,分析了K+对绿竹实生苗NaCl胁迫引起损害的解除效果及干旱处理对K+解除NaCl胁迫损害效果的影响;通过调研获得沿海滩涂等地区耐盐竹种资源,应用DNA条形码技术对包含32个耐盐竹种的98个竹种开展竹子属间、种间及耐盐竹种的聚类分析。本文获得如下研究结果:(1)纱布快速催芽法较海绵垫催芽法绿竹种子的露白时间从33 h缩短到7 h,95%发芽所需时间从168 h缩短到36 h,发霉率从4.47%下降到0.30%。(2)NaCl胁迫下第15 d时,CK组、0.25%组绿竹实生苗部分进入3叶期,生长健壮;0.50%组都达到2叶期,0.75%部分进入2叶期,1.00%组部分进入2叶期,植株生长矮小,细弱;平均株高、根长和鲜重均减少;渗透调节物质可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、甜菜碱的含量升高(P<0.01),MDA的含量升高、SOD先升高,高盐浓度下下降,显示对膜损伤的保护作用;POD、PPO的活性先高后低,显示低Na+浓度下的激活效应,随着Na+浓度的增高而降低,表明高Na+浓度对酶活性存在抑制效应。(3)通过Na+、K+同时处理的绿竹实生苗,在培养20天的相对稳定环境中,K+对Na+胁迫有极显著(P<0.01)的解除效果,但同时高Na+、高K+浓度下解除效果较差;可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸等渗透调节物质的含量在Na+浓度低于0.75%条件下呈增加的趋势(P<0.01),在1.00%的高Na+浓度下含量降低;MDA含量下降(P<0.05);浓度低于0.75%条件下PPO比POD对K+产生解除效应的响应快,1.00%的高Na+浓度胁迫下PPO响应不显著(P>0.05),POD的活力随K+浓度升高而降低(P<0.01);生理生化指标变化显示的保护效应与植株的生长状态表现一致。(4)Na+、K+同时处理的绿竹实生苗培养15天后干旱处理5天竹苗生长状况显著下降;在相同Na+浓度下,随K+浓度增加,可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸等调节渗透的物质含量呈先增后减的趋势;Na+浓度低于0.75%条件下,MDA含量呈下趋势降;在K+作用下,PPO活性下降,POD活力响应,在1.00%的高Na+浓度下活性升高(P<0.01);表明干旱处理对K+解除Na+胁迫效应的作用减弱。干旱处理5天与20天稳定条件培养组比较,干旱处理使根长变短,株高变矮,叶片黄化,叶片含水量减少;0.50%Na+和1.00%Na+处理的脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖和MDA含量均增加;PPO活力下降、POD活力上升。(5)ITS2可以区分并聚类不同属的竹种,但扩增率较低,在耐盐性区分上未能表现出显著的集中分组差异;matK在属间分类效果不显著,但可以聚类一些耐盐竹种;psbA-trn H,ndhF和rps16有很高的扩增效率,条形码的扩增具有很好的通用性,psbA-trnH很好地区分了瓜多竹属的竹种。ndhF、rps16两个条形码可以有效聚类牡竹属。
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