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研究目的:目前,自体脂肪移植广泛应用于国内外整形美容外科临床;然而,移植后的脂肪成活率不高（体积减少25%-70%）。通过不断探索,目前发现多种方法可以提高自体脂肪移植成活率,对移植的脂肪组织进行预处理（静置、离心等）就是其中之一。脂肪组织处理存在这样一个共识:去除已经失活的细胞、组织碎片、血细胞、血浆、油滴、肿胀液等,提高移植脂肪组织的纯度,减少移植脂肪组织的损伤,缩短脂肪处理的时间,缩短移植脂肪的注射前等待时间,更有益于移植脂肪的存活。本研究设计了一种新的脂肪组织处理方式,一个封闭的,可同时进行洗涤、过滤的装置。该装置由6个直径12mm的不锈钢球和3个孔径分别为2.4mm、1.2mm和0.8mm的过滤器组成。通过该装置,我们最终可以获得直径大小分别为2.4mm、1.2mm和0.8mm的颗粒脂肪组织。本研究的目的是:通过比较该装置（不同孔径滤过法）、静置法和离心法脂肪移植成活率之间的差异,探索提高自体脂肪移植成活率的新方法。研究方法:一、选取1名健康志愿者,签署知情同意书,选用3.5mm 口径、多侧孔、钝性吸脂管,运用注射器手动吸脂法,获取大腿内侧的颗粒脂肪组织240ml;二、150ml颗粒脂肪组织用不同孔径滤过法处理,获得直径大小分别为2.4mm、1.2mm和0.8mm的颗粒脂肪组织15ml、15ml和15ml,分别命名为F2.4组、F1.2组和F0.8组;60ml颗粒脂肪组织进行离心处理（离心速度为1000-1500r/min,离心时间为2mins,离心后去除上层脂滴及下层液体,将中层的脂肪收集备）,获得离心后的颗粒脂肪组织15ml,命名为C组;30ml颗粒脂肪组织进行静置处理（加入100ml生理盐水冲洗后静置沉淀30mins,待混合物分层后,去除上层脂滴及下层液体,将中层的脂肪收集备）,获得静置后的颗粒脂肪组织15ml,命名为G组（对照组）;三、颗粒脂肪大体观察:每组选取1ml样品,室温下肉眼观察（观察颜色、外观）;四、颗粒脂肪光镜观察:1、每组选取1ml样品,以HE染色,评估脂肪细胞的完整性;2、每组选取1ml样品,以台盼蓝染色观察细胞膜是否完整,评估活脂肪细胞数量;五、动物实验:共购买BALB/c-Foxnlnu裸鼠80只,随机分为F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组（对照组）,每组16只。于裸鼠背部戳孔,深达皮下,用18G注射钝针将0.3ml相应组颗粒脂肪抽注射到裸鼠背部皮下;六、8周时,每组随机选出4只裸鼠,切开裸鼠背侧皮肤,收集移植脂肪,进行大体观察（包膜有无,边缘有无血管长入）;后测量体积,计算体积保留率;后将其固定在福尔马林中,进行石蜡切片的制作,分别进行HE染色（观察脂肪细胞的完整性）、Masson染色（观察胶原纤维组织含量）、Perilipin-A免疫荧光染色（观察脂滴以评估脂肪细胞的存活情况）、CD31免疫荧光染色（观察新生血管密度）;七、统计分析:数据以所有组的平均值±标准差表示,当满足正态性（和方差同质性）假设时将应用ANOVA检验,否则将使用等效的非参数检验。使用α=0.05确定显着差异。采用SPSS20（IBM,USA）软件完成统计分析。研究结果:一、处理后的颗粒脂肪大体观察:1、F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组无明显差异;二、处理后的颗粒脂肪苏木素伊红染色:1、F2.4组、F1.2组、F0.8组、G组较C组脂肪细胞的完整性更好;2、F2.4组、F1.2组、F0.8组、G组脂肪细胞的完整性无明显差别;三、处理后的颗粒脂肪台盼蓝染色:1、F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组高倍显微镜下的活脂肪细胞计数分别为:36.00/HP、26.67/HP、17.33/HP、24.33/HP、60.33/HP;2、G 组较 F2.4 组、F1.2 组、F0.8 组、C 组细胞膜的完整性更好,即活脂肪细胞数量更多;3、F2.4组、F1.2组较C组、F0.8组细胞膜的完整性更好,即活脂肪细胞数量更多;4、F0.8组细胞膜的完整性最差,即活脂肪细胞数量最少;四、动物实验8周时移植颗粒脂肪的大体观察:1、F2.4组、F1.2组、F0.8组、G组较C组包膜更完整,边缘血管长入更密集;2、F2.4组、F1.2组、F0.8组、G组无明显差别;五、动物实验8周时移植颗粒脂肪的体积保留率:1、F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组的保留率分别为:47.22%±3.47%、55.56%±5.09%、41.11%±6.94%、34.44%±5.09%、45.56%±10.72%;2、B1.2 组的保留率最高,其次是 F2.4 组、G组、F0.8组3、C组的保留率最低;六、动物实验8周时移植颗粒脂肪的苏木素伊红染色:F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组的脂肪细胞的完整性无明显差异;七、动物实验8周时移植颗粒脂肪的Masson染色:F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组的胶原纤维含量无明显差异;八、动物实验8周时移植颗粒脂肪的Perilipin-A免疫荧光染色:F0.8组较F2.4组、F1.2组、C组、G组可观察到略微较多的perilipin阳性脂肪细胞,即F0.8组较F2.4组、F1.2组、C组、G组的脂肪细胞的存活情况略好;九、动物实验8周时移植颗粒脂肪的CD31免疫荧光染色:F2.4组、F1.2组、F0.8组、C组、G组的CD31免疫荧光OD值分别为:43383、54049、83595、43343、61272;2、F0.8组的新生血管密度最高,其次是G组、F1.2组、F2.4组,C组的新生血管密度最低。研究结论:本文通过体外实验和动物实验研究了不同的颗粒脂肪处理方法（不同孔径滤过法、离心法、静置法）之间的差异。在体外实验中,静置法得到的活脂肪细胞数量最多,其次是2.4mm孔径滤过法;在动物实验中,1.2mm孔径滤过法移植颗粒脂肪保留率最大。由此可以推断:不同孔径滤过法可以获得相对较多的活脂肪细胞;不同孔径滤过法可以提高颗粒脂肪组织的移植成活率。然而,需要进一步的研究来阐明机制。