【摘 要】
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妊娠成功与否与母体免疫抑制机制有着密切关系,绵羊胚胎丢失、流产严重影响养殖场的经济效益,而绵羊妊娠早期母体免疫抑制形成机理尚不清楚。NOD样受体(Nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptor,NLR)是一类固有免疫的模式识别受体,在机体免疫、炎症反应和早期胚胎发育中发挥独特的功能。IκB(Inhibitor of nuclear fact
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妊娠成功与否与母体免疫抑制机制有着密切关系,绵羊胚胎丢失、流产严重影响养殖场的经济效益,而绵羊妊娠早期母体免疫抑制形成机理尚不清楚。NOD样受体(Nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptor,NLR)是一类固有免疫的模式识别受体,在机体免疫、炎症反应和早期胚胎发育中发挥独特的功能。IκB(Inhibitor of nuclear factor kappa-B)和IκB激酶(IκB kinase,IKK)在免疫应答、炎症反应和凋亡中起着重要作用。脾脏是发生免疫应答的重要部位。通过研究早期妊娠对绵羊脾脏NOD样受体通路和IKK通路的影响,为绵羊妊娠免疫抑制机制提供依据。试验动物选用18月龄小尾寒羊,将24只母羊随机分为4组(每组6只),发情处理后,分别在配种后妊娠第13、16和25天以及未配种第16天时屠宰并采集脾脏。采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学试验方法,分析两个信号通路中基因和蛋白的表达情况。1.绵羊早期妊娠脾脏NOD样受体通路中NOD1、NOD2、CIITA(Major histocompatibility complex class II transactivator)、NAIP(Neuronal apoptosis inhibitory protein)、NLRP1、NLRP3和NLRP7的表达。结果表明,妊娠第13天和第16天的NOD1、NOD2、CIITA和NLRP3的表达水平低于未妊娠第16天和妊娠25天(P<0.05)。NAIP和NLRP7表达在妊娠第16天和25天与未妊娠第16天和妊娠第13天相比有显著升高(P<0.05)。但与未妊娠第16天和妊娠第25天相比,妊娠第13天和第16天的NLRP1表达水平上调(P<0.05)。免疫组织化学结果显示NOD2和NLRP7蛋白定位于被膜、小梁和脾索部。2.绵羊早期妊娠脾脏IKK通路中BCL-3(B-cell lymphoma factor 3)、IκBα、IκBβ、IκBε、IKKγ、NFKBID和IκBζ的表达。结果表明,与未妊娠第16天相比,BCL-3、IκBα、IκBε和IKKγ的表达水平在妊娠早期有明显上调(P<0.05),其中BCL-3在妊娠第16天的表达水平最高(P<0.05)。与未妊娠16天和妊娠第13天相比,IκBζ的表达水平在妊娠第16和25天明显上调(P<0.05)。此外,与未妊娠16天和妊娠第25天相比,IκBβ和NFKBID的水平在妊娠第16天明显上调(P<0.05),而IκBβ的水平在妊娠第13天出现下调(P<0.05)。免疫组织化学结果显示IκBβ和IKKγ蛋白定位于被膜、小梁和脾索部。综上所述,妊娠早期可诱导母体脾脏免疫功能的上调,这可能有利于调节妊娠早期母体的脾脏免疫反应,在妊娠早期有助于母体免疫耐受的调节,这对胚胎的植入和妊娠的正常维持具有重要作用。
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