论文部分内容阅读
目的：探讨CDH4/R-Cadherin对胃癌细胞上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition, EMT）的调控，及其对肿瘤干细胞特性的影响。方法：从正常胃粘膜上皮中克隆出CDH4基因，并通过慢病毒转染技术构建并筛选过表达CDH4的胃癌细胞株BGC-823（pLV-CDH4组）及干扰表达的胃上皮细胞株GES-1（siCDH4组）。检测稳转CDH4细胞株E-Cadherin、vemintin和twistmRNA和蛋白质表达量，并比较其与空载体组和空白对照组的差异；通过细胞划痕实验及Transwell小室功能实验比较转染后细胞迁移运动能力；采用MTT法绘制转染后细胞生长曲线；运用单因素方差分析比较转染后细胞成瘤能力。结果：(1) siCDH4组细胞E-Cadherin mRNA和蛋白质表达量下降，vemintin和twist表达量升高；pLV-CDH4组细胞E-Cadherin mRNA和蛋白质表达量升高，vemintin和twist表达量下降。(2) siCDH4组细胞迁移运动能力增强；pLV-CDH4组细胞迁移运动能力减弱。(3) siCDH4组细胞增殖速率加快，成瘤能力增强，siCDH4组与空载体组成瘤率之比为9.53%±0.82%vs2.8%±0.52%, P<0.001；pLV-CDH4组细胞增殖速率减慢，成瘤能力降低，pLV-CDH4组与空载体组成瘤率之比为6.80%±0.37%vs17.50%±0.63%, P<0.05。结论：CDH4/R-Cadherin可抑制胃癌细胞的恶性生物学行为，是降低胃上皮细胞发生EMT程度并获得肿瘤干细胞特性的关键因子。因此，CDH4/R-Cadherin可能是胃癌的潜在肿瘤抑制基因，靶向CDH4/R-Cadherin可能为未来肿瘤治疗提供新方向。