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目的：本研究将人表皮生长因子受体(EGFR)固定在毛细管内壁,制备毛细管电泳酶微识别反应器,研究新疆紫草活性成分β,β-二甲基丙烯酰紫草素对EGFR的抑制性能。方法：1、利用共价键法将酶EGFR固定于毛细管内壁,制备固定化酶微反应器。利用ATP作为底物,裸管作为空白对照,验证固定化酶效果。2、测试不同孵育时间对反应产率的影响,确定孵育时间。3、以ATP、ADP为底物和产物,确定其与出峰面积的相关性。4、以吉非替尼为对照组,与空白组比较,观察ATP与产物ADP的改变量,计算吉非替尼对EGFR的半抑制率IC50,验证方法的准确性。5、选择五组不同浓度的ATP和两组不同浓度的紫草提取物单体p,p-二甲基丙烯酰紫草素,根据米氏方程(Michaelis-Mentenequation),求出Km,判断抑制剂类型。6、固定ATP浓度,选择五组不同浓度的紫草提取物样品分别测定抑制率,每次重复三次。根据实验结果,计算抑制率,求出ICso。7、将吉非替尼、β,β-二甲基丙烯酰紫草素与ATP三者混合通入酶反应器,考察吉非替尼与β,β-二甲基丙烯酰紫草素联合使用效果。结果：1、制备了性能良好的EGFR酶微反应器。2、确定最佳孵育时间为lmin。3、 ATP浓度在0.01mmol/L—1mmol/L之间ATP浓度与出峰面积呈线性关系,线性方程为y=1.2E+5x+1956.8,相关系数R2=0.9967; ADP在0.12mmol/L-1.17mmol/L范围内,与出峰面积成线性关系。线性方程为y=3.7E+5x-7428.7,相关系数R2=0.9985。4、 利用阳性药吉非替尼组与空白组比较,根据不同浓度抑制剂的抑制率结果,拟合S曲线,求出吉非替尼半抑制率IC50为39.80μmol/L,与文献结果相近,表明此测定方法可靠。5、 两个不同浓度β,p-二甲基丙烯酰紫草素与5个ATP浓度分别混合,同时以缓冲液替代β,β-二甲基丙烯酰紫草素与ATP混合做空白组。根据三组实验结果,应用双倒数作图法,得空白组Km=0.4366mmol/L,添加抑制剂的两组实验Km基本保持不变,Vmax均变小,判断p,p-二甲基丙烯酰紫草素可能为非竞争性抑制剂。6、 根据不同浓度抑制剂抑制率结果,由Graphpad拟合抑制率S曲线,求得β,p-二甲基丙烯酰紫草素的IC50为77.08μmol/L。7、 将吉非替尼、p,p-二甲基丙烯酰紫草素与ATP三者混合通入酶反应器,吉非替尼相对于不添加β,p-二甲基丙烯酰紫草素时消耗量减少且抑制作用不减弱。结论：本实验利用毛细管电泳酶微反应器研究了β,p-二甲基丙烯酰紫草素对EGFR酶抑制作用。结果表明p,p-二甲基丙烯酰紫草素对EGFR酶有一定抑制作用,抑制类型为非竞争性抑制。该方法简单可靠,且具有普适性,可广泛应用于中药提取物活性成分的研究。