莲花蜂花粉多糖的提取、分离及生物活性的研究

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蜂花粉是纯天然的保健品之一,被誉为全能营养库。多糖是蜂花粉重要有效成分之一,具有较好的潜在开发价值。本文对莲花蜂花粉多糖的提取、分离、初步纯化及生物活性进行了研究,结果如下:1.在超声波破壁的基础上研究了水提法提取莲花蜂花粉多糖的条件,在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,选取料液比、浸提时间和浸提温度3个因素的3个水平进行响应面分析,建立多糖得率的二次回归方程,得到提取工艺的优化组合条件。试验结果表明:料液比、浸提时间和浸提温度对莲花蜂花粉多糖得率都有显著影响,当提取工艺条件为料液比1:9.4,时间2.4 h,温度81.6℃,浸提2次时,多糖得率达到极大值。此条件下莲花蜂花粉多糖得率预测值为1.2201%,验证值为1.2317%。2.不同体积乙醇沉淀莲花蜂花粉多糖效果的研究表明,乙醇体积为多糖液体积的3.5倍时,沉淀效果最好。通过对五种不同脱蛋白方法效果的比较,确定胰蛋白酶+Sevage法为莲花蜂花粉多糖提取时脱蛋白的最佳方法,蛋白清除率为82.51%。多糖经Sephadex G-75的洗脱,出现两个洗脱峰,其中分子量较大的含量少于分子量较小的。3.根据Fenton反应体系,通过对莲花蜂花粉多糖清除羟自由基试验的研究,可知当精制莲花蜂花粉多糖和粗多糖质量浓度同为2.5 mg/mL时,羟自由基的清除率分别达64.58%和56.82%;采用邻苯三酚自氧化测定法,通过对莲花蜂花粉多糖清除超氧阴离子自由基试验的研究,可知当精制多糖和粗多糖质量浓度同为1.3 mg/mL时,超氧阴离子自由基清除率分别达到58.28%和52.52%。表明莲花蜂花粉多糖对羟自由基、超氧阴离子自由基都具有较好的清除作用,且初步纯化后多糖的清除效果比粗多糖好。4.通过对莲花蜂花粉多糖降血脂作用的研究,得知大鼠灌胃给药低(150 mg/kg.d)、中(300 mg/kg.d)、高(600 mg/kg.d)剂量的莲花蜂花粉多糖,能显著降低试验性高脂血症大鼠血清中的总胆固醇TC含量,但对大鼠血清中甘油三脂TG和高密度脂蛋白HDL-C含量作用不明显。表明莲花蜂花粉多糖有一定的降血脂功效。
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