复方中草药和果寡糖对罗非鱼免疫性能的影响

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本论文研究了两种免疫增强剂(复方中草药制剂和果寡糖)对尼罗罗非鱼血液免疫酶类活性及其在胁迫条件下血液化学物质变化的影响。研究分为三部分:第一部分:复方中草药对尼罗罗非鱼血液非特异性免疫功能的影响本实验研究了在饲料中添加一种以鱼腥草为主要成分的复方中草药制剂对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)血液非特异性免疫功能(或指标)的影响。将鱼腥草、黄芩、板蓝根、连翘、金银花等10种中草药按一定比例充分粉碎后混匀制成以鱼腥草为主要成分的复方中草药制剂,按质量分数0%(对照组)、1%(A组)、3%(B组)、6%(C组)分别添加到基础饲料中投喂尼罗罗非鱼(体质量54±0.32g),共进行为期12周的饲养试验。其中在第4、8、12周测定其血清免疫指标,并在第12周进行采样测定全血免疫指标。试验结果表明:从第8周开始,B组尼罗罗非鱼血清丙二醛(MDA)含量降低极为显著(P<0.01),而C组中尼罗罗非鱼血清溶菌酶(LSZ)活力显著提高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力、一氧化氮(NO)含量提高极为显著(P<0.01),并且MDA含量极显著的降低(P<0.01)。至第12周,B组中尼罗罗非鱼血清SOD活力和血细胞呼吸爆发活性极显著提高(P<0.01),血清LSZ活力、NO含量显著提高(P<0.05);C组中尼罗罗非鱼血清SOD活力、NO含量、血清LSZ活力、吞噬百分比、吞噬指数、呼吸爆发活力均极显著提高(P<0.01),而MDA含量则降低极为显著(P<0.01)。结果表明:在饲料中添加3%和6%质量分数的以鱼腥草为主要成分的复方中草药制剂均能增强尼罗罗非鱼的免疫力,其中以添加6%的质量分数的效果最好。第二部分:果寡糖对尼罗罗非鱼非特异性免疫及抗病力的影响上述研究结果表明在基础饲料中添加6%的复方中草药可以有效提高尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)血液非特异性免疫功能。本实验目的是研究在含有复方中草药的饲料中添加果寡糖(FOS)对尼罗罗非鱼非特异性免疫及抗病力的影响。分别在饲料中添加0(对照组)、1(A试验组)、3(B试验组)和5(C试验组)g/kg的果寡糖投喂尼罗罗非鱼(体质量3±2.43g),共进行为期90d的饲养试验。在第30、60、90d分别取样测定其血清免疫指标及在试验结束时用无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)对其进行攻毒处理。试验结果表明:A组尼罗罗非鱼血清溶菌酶(LSZ)活力和血清过氧化氢酶(CAT)活力均从第60d开始与对照组相比差异显著(P<0.05),并分别于第60d和第90d达到最大值;其血清超氧化物歧化酶(SOD)活力在第30d后开始显著高于对照组(P<0.05),在第90d达到峰值;A组血清丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05),并在第90d达到最低值;A组碱性磷酸酶(AKP)活性和血清中一氧化氮(NO)的含量与对照组相比差异不显著(P>0.05)。B组尼罗罗非鱼血清LSZ活力和碱性磷酸酶(AKP)在第60d后显著高于对照组(P<0.05),分别于第60d和第90d达到最大值;其血清SOD酶活力和过氧化氢酶(CAT)活力均从第30d开始显著高于对照组(P<0.05),分别于第60d和第90d达到最大值;B组血清MDA含量显著低于对照组(P<0.05),在第60d达到最低值;B组中血液NO含量与对照组差异不显著(P>0.05)。B组血清SOD活力和AKP活力第60d时与A组差异显著(P<0.05),而B组CAT活力在第90天时与A组差异显著(P<0.05)。C组的血清溶菌酶活力、血清SOD活力、血清AKP活力、血清MDA含量、血清CAT活力和血清NO含量与对照组相比在各时间点均无显著差异(P>0.05)。用无乳链球菌强毒株进行腹腔注射攻毒,结果表明:A组和B组的免疫保护率分别为55.81%和67.44%,可以显著提高尼罗罗非鱼对无乳链球菌的抵抗能力,降低其死亡率;C组的免疫保护率为6.9%,有轻微保护作用。第三部分:两种环境胁迫下果寡糖对罗非鱼血液中皮质醇及血糖的影响上述研究结果表明在含有6%复方中草药的饲料中添加1~3g/kg的果寡糖可以有效提高尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)血液非特异性免疫功能。本实验目的是研究在两种环境胁迫条件下果寡糖(FOS)对罗非鱼血液中皮质醇(COR)及血糖(GLU)的影响。分别在含有6%的中草药饲料中添加0g/kg(对照组)、1g/kg(A试验组)、3g/kg(B试验组)和5g/kg(C试验组)的果寡糖投喂尼罗罗非鱼,进行为期90d的饲养试验。饲养试验结束后,一部分试验鱼进行致病菌胁迫试验:每组取25尾鱼,两个重复,对试验鱼腹腔注射0.1mL浓度为1.0×106cfu/mL的无乳链球菌(Streptococcus agalactiae),分别在0h、3h、12h、24h、36h、48h取血样分析其血液中皮质醇及血糖含量。另一组试验鱼进行拥挤胁迫试验:每组取一定量的鱼,进行连续48h的拥挤胁迫(35g/L)试验,分别在0h、3h、12h、24h、36h、48h取血样分析其血液中皮质醇及血糖含量。致病菌胁迫试验结果表明:各个组的血液皮质醇及血糖含量在胁迫后前24h内显著提高,其中A组和B组与对照组相比差异显著,C组与对照组差异不明显;在第24h各个组都达到了最大值,但随着时间的推移各组中COR及GLU含量逐渐下降,一段时间后恢复至与对照水平保持稳定。拥挤胁迫试验结果表明:在试验前,各组鱼血液中皮质醇及血糖含量无明显差异,试验后3h,所有组鱼的血液皮质醇及血糖含量都显著上升,上升趋势持续至第12h和第24h,其中A组和B组与对照组相比差异显著,C组与对照组相比略低,随后各个组皮质醇及血糖含量开始下降,最终3个处理组与对照水平保持稳定。结果表明,添加1~3g/kg的FOS可以有效提高罗非鱼机体的免疫调节能力,缓解鱼类在受到外界刺激引起剧烈的生理变化。
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