【摘 要】
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目的:研究siRNA沉默DAD1基因对人参皂苷Rh2体外抗膀胱癌效果的影响,探讨中药提取物人参皂苷Rh2联合RNAi技术抗肿瘤的可能性和实验效果,为临床的综合抗肿瘤治疗提供实验室依据
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目的:研究siRNA沉默DAD1基因对人参皂苷Rh2体外抗膀胱癌效果的影响,探讨中药提取物人参皂苷Rh2联合RNAi技术抗肿瘤的可能性和实验效果,为临床的综合抗肿瘤治疗提供实验室依据。方法:本研究主要对象是人膀胱癌细胞BIU-87:首先采用不同浓度人参皂苷Rh2作用于膀胱癌细胞株BIU-87,MTT法检测其增殖能力,筛选出最适宜的人参皂苷Rh2作用条件;然后人参皂苷Rh2联合转染siRNA-DAD1干预膀胱癌细胞株BIU-87;MTT法检测联合作用后的BIU-87细胞增殖能力;实时荧光定量PCR检测DAD1 mRNA的表达水平;免疫印迹法检测DAD1蛋白的表达水平;流式细胞术检测膀胱癌细胞BIU-87的凋亡水平;Transwell检测各组膀胱癌细胞株BIU-87的侵袭能力变化。结果:人参皂苷Rh2不同浓度和干预时间可以对膀胱癌细胞BIU-87的增殖能力有一定程度的抑制作用(P<0.05);人参皂苷Rh2 40umol/L联合siRNA-DAD1作用膀胱癌细胞BIU-87后,MTT法检测膀胱癌细胞BIU-87的增殖水平下降(P<0.05);荧光定量PCR检测结果显示膀胱癌细胞BIU-87中的DAD1 mRNA表达水平降低了(P<0.05);免疫印迹检测结果显示膀胱癌细胞BIU-87中的DAD1蛋白表达水平降低了(P<0.05);流式细胞术实验结果显示膀胱癌细胞BIU-87的凋亡水平升高了(P<0.05);Transwell检测结果显示膀胱癌细胞BIU-87的侵袭能力显著下降(P<0.05)。结论:1.一定浓度的人参皂苷Rh2可以抑制膀胱癌细胞BIU-87增殖。2.人参皂苷Rh2联合siRNA-DAD1作用于膀胱癌细胞BIU-87可以显著抑制DAD1的表达,并且促使其发生凋亡,抑制其侵袭能力。
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