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目的肿瘤易感基因(tumor susceptibility gene101，TSG101)真核表达质粒转染人胃癌SGC-7901细胞，建立稳定高表达TSG101细胞株，探讨TSG101在胃癌细胞SGC7901侵袭和转移中的作用。通过加入PI3K/Akt信号通路抑制剂抑制剂LY294002观察高表达TSG101SGC-7901胃癌细胞侵袭和转移的变化，为阐明TSG101的生物学功能和胃癌侵袭、转移的分子机制奠定理论基础。方法1.通过lipofectamineTM2000转染试剂将TSG101真核表达质粒pIRES2-TSG101-IRES-EGFP和空载体质粒pIRES2-EGFP转入人SGC-7901细胞中，通过G418筛选，挑取单克隆扩大培养，利用RT-PCR和Western blot方法检测转染细胞株TSG101的表达情况，建立稳定高表达TSG101的细胞株。设TSG101真核表达组、质粒组、空白细胞组。2.通过侵袭实验、迁移实验、黏附实验及损伤刮擦实验检测TSG101表达改变对胃癌细胞侵袭和转移能力的影响。3.选用LY294002体外作用于转染细胞株，观察高表达TSG101SGC-7901胃癌细胞侵袭能力的变化。结果1.用RT-PCR与Western Blot检测稳定转染的SGC-7901细胞的TSG101表达情况可知：TSG101真核表达组TSG101mRNA和蛋白表达水平均高于质粒组和空白对照组(0.85±0.09比0.55±0.07、0.45±0.07，29.4±1.2比17.0±0.4、15.9±0.4，均P<0.05）。2. Transwell侵袭实验结果显示：TSG101真核表达组细胞穿过基质胶、层黏连蛋白和Ⅳ型胶原层的细胞数（84±14、128±10、62±7）均高于质粒组（55±9、77±10、31±6）与空白对照组（48±8、76±9、24±5，均P<0.01），而质粒组与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；各组细胞穿过Matrigel、层粘连蛋白、IV型胶原细胞数差异有统计学意义（P<0.05）。3.黏附实验结果显示：TSG101真核表达组细胞黏附于铺制基质胶、层黏连蛋白和IV型胶原的细胞数（0.97±0.04、1.34±0.04、0.90±0.01）高于质粒组（0.53±0.03、0.75±0.05、0.42±0.02）与空白对照组（0.60±0.03、0.72±0.03、0.40±0.01，均P<0.01），而质粒组与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。4. Transwell迁移实验结果显示：TSG101真核表达组细胞迁移至膜下表面的数量高于质粒组和空白对照组（87±13比48±7、54±8，均P<0.01），而质粒组与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。5.损伤刮擦实验：培养24、48h TSG101真核表达组细胞融合速度明显快于质粒组及空白对照组。6.干预实验：加入LY294002后TSG101真核表达组细胞穿过Matrigel的细胞数量高于质粒组和空白对照组（608比3411、234，均P<0.01），而质粒组与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；各组细胞加入LY294002后穿过Matrigel细胞数明显减少，差异有统计学意义（P<0.01）。结论稳定转染TSG101真核表达质粒后SGC-7901细胞表达TSG101明显增高，侵袭转移能力也明显增强；加入LY294002后，高表达TSG101的SGC-7901细胞的侵袭和转移能力明显下降。