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传染性法氏囊病毒(IBDV)会导致鸡发生严重的免疫抑制疾病,从而引起巨大的经济损失。自然条件下,IBDV广泛存在于周围环境中并且可以通过呼吸进行传播。IBDV感染的靶器官主要是法氏囊,会引起法氏囊肿大和出血等症状,使机体的免疫力下降,对其它病原因子的抵抗力下降,从而继发感染多种疾病。IBDV抗原结合表位是病毒分子感染宿主细胞的主要部位,也是药物治疗的靶序列。如果能找到正确的病毒表位,在IBDV感染宿主之前,采取相应措施切断病毒的感染途径,就能起到很好的保护作用。本实验室根据已经报道的VP2蛋白的三维晶体结构,合成了VP2蛋白的五段序列,发现其中一条多肽P22可能是IBDV的抗原表位。方法本次实验将P22多肽进行了原核表达,发现其主要以包涵体形式存在。用镍柱纯化带His标签的P22多肽,纯化后的P22多肽放入透析袋中透析复性。SDS-PAGE检验多肽的纯化程度,Western blot检测P22多肽的特性。用IBD抗原快速检测试纸条验证Western blot结果。15日龄的SPF鸡颈部皮下接种P22多肽,二免后取P22抗血清。琼脂扩散实验和中和效价测定P22抗血清的特异性和保护细胞能力。结果SDS-PAGE结果表明获得了比较纯的P22多肽。Western blot结果表明P22多肽可以和IBDV单抗上清、IBDV标准阳性血清起特异反应,和IBDV阴性血清不反应。P22多肽可以与IBD快速检测试纸条发生特异反应,试纸条的控制线和检测线均显示红色条带。琼脂扩散实验显示P22抗血清和IBDV强毒株可以形成明显的免疫沉淀线,IBDV强毒株和IBDV单抗上清之间也有清晰的免疫沉淀线。随机选择3份P22抗血清,在Vero细胞上检测中和效价,结果分别是1：640,1：650和1：620。结论P22是IBDV VP2蛋白上的抗原决定簇,P22是VP2的线性B细胞抗原表位。