【摘 要】
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目的:（1）研究Mg-3Nd-1Gd-0.3Sr-0.2Zn-0.4Zr合金对金黄色葡萄球菌生物膜形成及黏附的影响及作用机制;（2）研究Mg-3Nd-1Gd-0.3Sr-0.2Zn-0.4Zr合金对金黄色葡萄球菌毒力的影响。方法:（1）新型镁合金对金黄色葡萄球菌生物膜形成及黏附的影响:实验分为两组:分别为新型镁合金组（实验组）及钛合金组（对照组）。将金黄色葡萄球菌分别与新型镁合金和钛合金浸提液共培
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目的:（1）研究Mg-3Nd-1Gd-0.3Sr-0.2Zn-0.4Zr合金对金黄色葡萄球菌生物膜形成及黏附的影响及作用机制;（2）研究Mg-3Nd-1Gd-0.3Sr-0.2Zn-0.4Zr合金对金黄色葡萄球菌毒力的影响。方法:（1）新型镁合金对金黄色葡萄球菌生物膜形成及黏附的影响:实验分为两组:分别为新型镁合金组（实验组）及钛合金组（对照组）。将金黄色葡萄球菌分别与新型镁合金和钛合金浸提液共培养3、6、12、18、24h,使用滴板稀释计数法算出两组各时间点细菌浓度,绘制成细菌生长曲线,研究新型镁合金对金黄色葡萄球菌增殖的影响;将金黄色葡萄球菌与两组合金共培养6h、12h、24h,使用结晶紫染色法定量合金表面形成的生物膜,研究新型镁合金对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响;金黄色葡萄球菌与两组合金共培养6h、12h、24h,用活/死细菌荧光染色对合金表面黏附的细菌进行荧光染色,使用激光共聚焦显微镜观察合金表面细菌的黏附,将与金黄色葡萄球菌共培养24h的两组合金在扫描电子显微镜下观察合金表面的细菌,研究新型镁合金对金黄色葡萄球菌在材料表面黏附的影响;将金黄色葡萄球菌与两组合金的浸提液共培养24h,用实时荧光定量PCR法检测黏附相关基因ica A、fnb A和clf A的表达。（2）新型镁合金对金黄色葡萄球菌毒力的影响:实验分为两组:分别为新型镁合金组（实验组）及钛合金组（对照组）。将金黄色葡萄球菌与两组合金浸提液共培养24h,用实时荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌毒力相关基因hla、luks的表达,用Western blot法检测金黄色葡萄球菌毒力相关蛋白hla、luks的表达。结果:（1）新型镁合金对金黄色葡萄球菌生物膜形成及黏附的影响:滴板计数绘制细菌的生长曲线结果显示,钛合金组的金黄色葡萄球菌随着培养时间的增加细菌增殖明显,而镁合金组与钛合金组相比细菌生长明显受到了抑制,虽然细菌数有所增多,但是增长缓慢,且在6h后细菌增长曲线趋于平缓。结晶紫染色法结果显示,随着培养时间的增长,钛合金表面的金黄色葡萄球菌生物的量显著增多,而镁合金表面生物膜的量到12h的时候增多,而到达24h的时候减少。分别在6、12、24h镁合金表面金黄色葡萄球菌生物膜的的量均少于钛合金表面,差异有统计学意义（P＜0.05）,且随着培养时间的增加差异越大。激光共聚焦显微镜结果显示,随着培养时间的增长,金黄色葡萄球菌在钛合金和镁合金表面的黏附数量逐渐增长,但是,与钛合金组相比,金黄色葡萄球菌在镁合金表面的黏附数量增长较慢。分别在6、12、24h,金黄色葡萄球菌在镁合金表面黏附的数量均较钛合金组少,且随着培养时间延长,两组差异越大。扫描电子显微镜结果显示,在钛合金表面可见大量的金黄色葡萄球菌,呈葡萄串状排列,而在镁合金表面只有极少数的金黄色葡萄球菌,明显少于钛合金表面。Q-PCR检测基因ica A、fnb A和clf A的表达结果显示,相比于钛合金组,镁合金组黏附相关基因ica A、fnb A和clf A的表达量都明显减低,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）新型镁合金对金黄色葡萄球菌毒力的影响:Q-PCR法检测基因hla、luks的表达结果显示,与钛合金组相比,镁合金组毒力相关基因hla、luks的表达量都明显减低,差异有统计学意义（P＜0.05）。Western blot法检测蛋白hla、luks的表达结果显示,hla和luks蛋白在新型镁合金组的表达量均较钛合金组少。结论:（1）Mg-3Nd-1Gd-0.3Sr-0.2Zn-0.4Zr合金对金黄色葡萄球菌的增殖、生物膜的形成及黏附均有抑制作用,该抑制作用可能与黏附相关基因ica A、fnb A和clf A的表达下降有关。（2）Mg-3Nd-1Gd-0.3Sr-0.2Zn-0.4Zr合金对金黄色葡萄球菌毒力有抑制作用,该抑制作用可能与毒力相关基因hla、luks的表达下降有关。
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