【摘 要】
：
葡萄无色原花青素还原酶（leucoanthocyanidin reductase,VviLAR）是调控葡萄原花青素单体合成的一个关键还原酶,其还原产物（+）-儿茶素作为葡萄原花青素的重要合成起始单元,影响着葡萄原花青素的合成过程。为了探索葡萄无色原花青素还原酶的表达调控,我们选择了四种方法来筛选可能结合VviLARs启动子的转录因子,并通过酵母单杂交和双荧光素酶试验对转录因子与启动子之间的相互作用
【基金项目】
：
国家重点研发计划课题（2020YFD1000204、2018YFD1000204）; 国家自然科学基金项目（32072554）
论文部分内容阅读
葡萄无色原花青素还原酶（leucoanthocyanidin reductase,VviLAR）是调控葡萄原花青素单体合成的一个关键还原酶,其还原产物（+）-儿茶素作为葡萄原花青素的重要合成起始单元,影响着葡萄原花青素的合成过程。为了探索葡萄无色原花青素还原酶的表达调控,我们选择了四种方法来筛选可能结合VviLARs启动子的转录因子,并通过酵母单杂交和双荧光素酶试验对转录因子与启动子之间的相互作用进行了分析,同时还分析了与VviLARs启动子结合的VviWRKYs转录因子的作用机制及其功能。主要研究结果如下:1筛选与VviLARs启动子互作的转录因子。通过四条途径筛选到了21个转录因子,并利用酵母单杂交对筛选到的转录因子与VviLARs启动子的相互作用进行了试验验证,利用双荧光素酶试验验证了转录因子对VviLARs启动子活性的影响。结果发现有4个Vvi MYBs转录因子和7个VviWRKYs转录因子能够与VviLARs启动子结合,其中VviWRKY6-2,Vvi MYB3R-5,Vvi MYBPA8和Vvi MYB169能够结合并激活VviLAR1启动子活性,而VviWRKY57-2和VviWRKY20-2则能够结合并抑制VviLAR1的启动子活性;VviWRKY57-1,Vvi MYBPA8和Vvi MYB169能够结合并激活VviLAR2的启动子活性,而VviWRKY40-1,VviWRKY20-2,VviWRKY11-1,VviWRKY65-1,Vvi MYB172和Vvi MYB3R-5能够结合并抑制VviLAR2的启动子活性。2验证与VviLARs启动子互作的VviWRKYs转录因子与Vvi ANR1启动子的结合。通过酵母单杂交技术验证发现VviWRKY6-2,VviWRKY11-1,VviWRKY40-1,VviWRKY65-1和VviWRKY57-1同样也能结合到Vvi ANR1启动子上,而VviWRKY6-2和VviWRKY20-2则不与Vvi ANR1启动子结合;利用双荧光素酶试验转录因子对Vvi ANR1启动子活性的影响,结果发现VviWRKY57-2能够上调Vvi ANR1启动子活性,VviWRKY40-1,VviWRKY11-1,VviWRKY57-1和VviWRKY65-1则对Vvi ANR1的启动子活性起到抑制作用。3分析与VviLARs启动子互作的VviWRKYs转录因子之间的相互作用。形成同源二聚体或异源二聚体是WRKY转录因子之间常见的相互作用,这会影响到WRKY转录因子与启动子的结合。因此利用酵母双杂交技术和双分子荧光互作试验对7个VviWRKYs转录因子之间的相互作用进行了验证,结果发现VviWRKY6-2,VviWRKY11-1和VviWRKY20-2自身能够形成同源二聚体,而VviWRKY57-1和VviWRKY20-2之间则能够形成异源二聚体。亚细胞定位技术发现VviWRKY6-2,VviWRKY11-1,VviWRKY20-2,VviWRKY57-1和VviWRKY20-2都定位在细胞核中。利用双荧光素酶试验分析发现,VviWRKY57-1和VviWRKY20-2形成的异源二聚体能够抑制VviLAR2的启动子活性。4验证与VviLARs启动子互作的VviWRKYs转录因子对植物原花青素合成的影响。通过在烟草叶片瞬时转化7个OE-VviWRKYs转录因子发现,VviWRKY6-2和VviWRKY57-1能够明显提高烟草叶片中原花青素含量,而VviWRKY40-1,VviWRKY11-1,VviWRKY57-2,VviWRKY65-1和VviWRKY20-2则抑制了烟草叶片中原花青素的合成。将OE-VviWRKY20-2和OE-VviWRKY57-1稳定转化葡萄愈伤组织,结果发现OE-VviWRKY20-2能够明显抑制愈伤组织中的原花青素合成,而OE-VviWRKY57-1则明显提高了葡萄愈伤中原花青素的含量。
其他文献
＜正＞李贽（1527—1602），初名载贽，字宏甫，号卓吾，又号温陵居士、百泉居士等，福建泉州人。明代思想家、文学家、史学家，泰州学派的代表人物。在文学方面，提出“童心说”，反对当时盛行的复古之风，强调创作应表现作者的真性情，认为“天下之至文，未有不出于童心焉者也”，而所谓“童心”即是“绝假纯真，最初一念之本心”（《童心说》），就是说创作要真实坦率地表露作者内心的情感和人生的欲望，抒发己见。诗文作
【研究目的】钴是重要的新能源矿产，动力电池装机量的急速攀升为其带来了广阔的市场发展前景，把握钴资源特点及供需形势对于地质勘查行业及后段产业链均具有重要意义。【研究方法】主要通过调查法、定量分析法与定性分析法，对调查中收集的大量数据进行分析、比较、总结归纳。【研究结果】从钴的全球资源分布特征、供应及贸易格局、消费历史及趋势等方面系统地分析了全球钴资源的特点及供需形势，同时结合产业现状对钴市场前景进行
目的 通过对产甲胎蛋白胃癌（AFPGC）患者的临床特征、中药使用和生存情况进行分析，以期提高中医临床医生对AFPGC的认识。方法 回顾性收集2012年1月—2018年12月经病理诊断并且联合中医药治疗的胃癌患者病例，经纳入、排除标准筛选后，纳入AFPGC患者46例与普通胃癌患者363例。通过对比临床及生存特征，分析不同甲胎蛋白（AFP）水平患者的生存差异，COX多因素回归分析判断AFPGC患者预后
＜正＞党的十八大以来，我国生态文明建设发生历史性、转折性、全局性变化，“天蓝、地绿、水清”的美丽画卷正在徐徐绘就。成绩取得的背后有一个默默无闻奉献的集体——财政部自然资源和生态环境司生态环境处。自2019年5月成立以来，生态环境处始终认真践行习近平生态文明思想，切实扛起生态文明建设的政治责任，突出党建引领作用，不折不扣地履行好财政职责，积极研究出台打好污染防治攻坚战、推动碳达峰碳中和系列财政支持政
大明湖是济南的三大名胜之一,其水体资源受到了广泛的关注。本文首先介绍了大明湖的水质及水源,回顾了以往大明湖水资源的利用情况,并从实际出发,对大明湖水资源现存的主要问题及发展前景进行了探讨。
在生产力被极大提升的当下,科学技术的飞跃也在推动着生活品质不断提升。马斯洛需求金字塔则论述了为何当今社会人们对个性定制服务的关注与更高的要求。在人类逐渐步入信息化时代与工业4.0时代的这一进程中,生产力进步后也让人们对区别于其他人的个性化需求的迎来了更大面积的觉醒。当代社会背景下的年轻人的自我意识觉醒表现得更为明显,新新人类在慢慢脱离群体化标签的同时也追求着更为量身的个性化定制服务,以人为本的设计
采用分段式MVR热泵精馏技术对甲醇水进行分离，同时构建换热网络，实现塔顶冷凝热和塔釜汽化热的匹配。采用aspen plus 10.0软件，对常规精馏和热泵精馏工艺流程进行模拟，并对两种不同技术的能耗和经济性进行对比。结果表明：热泵精馏技术能耗节省约70%，分段式压缩机一次性投资较高，结合能耗对比结果，短期内能收回成本，因此经济效益可观，具有推广应用价值。
＜正＞0引言当今世界经济的快速发展，导致煤、石油、天然气等传统不可再生能源正面临枯竭，人们亟需开发多种新型的可再生能源，以面对传统能源枯竭的危机。目前，新能源异军突起，包括太阳能、海洋能、风能、生物质能、核聚变能等等，极大地满足了人们对能源的需求。生物质能是新能源中的一种，来源于生物质，也是太阳能以化学能形式贮存于生物中的一种能量形式，具有清洁、可再生等特性，逐渐收到人们的重视，成为解决能源危机和
教研活动作为教师工作中的重要一环,对提升学校教育质量,促进教师专业发展起到了重要的作用。同时,教研工作是推进教育改革的有效途径也是保障教育质量的重要支撑。对合作教研活动的现状进行调查研究,不仅可以了解到当前中学物理教师开展合作教研活动时出现的问题,也可以帮助中学物理教师有效开展合作教研活动,促进教师专业发展,推进教育有效改革。因此,研究中学物理教师合作教研现状及其中存在的问题等具有一定的现实意义。