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背景和目的尖锐湿疣(CA)由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起,是一种常见的性传播疾病(STD),近年来本病在全球的发病率不断上升,这与其传播方式、性开放的程度和HPV的生物学行为有关。HPV是目前发现最小的双链球型DNA病毒,特异性感染人类,引起皮肤及黏膜的病变。据报道目前HPV型别已超过180种,但90%以上的CA感染是由HPV6、11型引起。感染对象主要是性活跃的青年男女,潜伏期20天~6个月不等,平均3个月,显性感染有典型临床表现,肉眼可见淡红色的丘疹或乳头瘤样的疣体,继发感染后可伴有糜烂、恶臭、瘙痒及疼痛等不适,疣体长期不愈,可出现恶变。临床发现CA传染性强,疣体生长迅速,治疗后易复发,部分疣体有癌变倾向,加重了患者的经济、心理负担,导致患者生活质量降低。目前无直接清除HPV感染的药物,CA常规治疗后易复发。光动力疗法(PDT)是近年来治疗CA的一种新方法,皮肤科应用较多的是艾拉光动力疗法(ALA-PDT)。大量的临床资料已证实ALT-PDT在CA的治疗上有着创伤小、安全性高、耐受性好等优点,并可清除亚临床感染、降低复发。ALT-PDT治疗CA的具体机制尚不十分清楚,Bcl-2和Survivin是两种较为肯定的凋亡抑制因子,在多种肿瘤组织中高表达,在CA中的研究不多,本实验我们通过检测ALA-PDT治疗前后CA组织中凋亡抑制因子Bcl-2和Survivin的表达变化来探讨ALA-PDT治疗CA的相关机制。材料及方法1材料48例CA患者均来自2014年9月~2015年9月来郑州大学第一附属医院皮肤科门诊的患者,其中男28例,女20例,年龄为18~60岁,平均33.25岁;病程2周~到4个月,平均为53.10天;男性疣体主要见于阴茎、肛周等部位;女性主要分布在大小阴唇、外阴等部位。临床表现符合典型CA临床特征,醋酸白试验阳性,原位杂交显示HPV感染,组织病理下见挖空细胞。所有患者无其他系统性疾病,传染病四项全阴性,就诊前未进行任何治疗。2方法对符合入选标准的48例CA患者采用ALT-PDT治疗,治疗前的CA组织为对照组,治疗后1周的CA组织为实验组。采用免疫组化SP法,检测治疗ALT-PDT前后CA组织细胞中凋亡抑制因子Bcl-2和Survivin的表达情况。结果判定:Bcl-2的阳性表达定位于细胞浆,Survivin的阳性表达主要定位在细胞浆,胞核也有表达,二者阳性表现均为淡黄色至棕褐色颗粒样物质。评定标准采用半定量等级评分:观察阳性表达的着色强度和细胞百分数,着色强度评分标准为:0、1、2、3分,分别对应不着色、淡黄色、黄色、棕黄或棕褐色;阳性细胞占总细胞的百分比:0、1、2、3、4分,依次对应≤10%、11%~25%、26%~50%、51%~75%、≥76%。分别算得各自的评分后相乘得出总分,评判如下:0分代表阴性,1-4分代表弱阳性(+),6-8分代表阳性(++),9-12分代表强阳性(+++)。3统计学处理采用SPSS21.0统计软件对数据进行分析,Bcl-2和Survivin在ALT-PDT治疗前后的阳性表达率比较采用χ~2检验;阳性表达强度差异比较采用秩和检验,Bcl-2和Survivin在ALT-PDT治疗后的相关性分析采用Spearman等级相关性分析,检验标准P<0.05,为差异具有统计学意义。结果1 Bcl-2在光动力前后CA组织细胞中的表达48例ALA-PDT治疗前CA细胞中Bcl-2阳性表达42例,阳性表达率为87.50%(42/48),表达强度多在++~+++;48例ALA-PDT治疗后CA组织细胞中Bcl-2阳性表达18例,阳性表达率为37.50%(18/48),表达强度多为+;治疗前后两组阳性表达率差异有统计学意义(χ~2=25.60,P<0.001),两组阳性表达强度差异具有统计学意义(H=38.40,P<0.001)。2 Survivin在光动力前后CA组织细胞中的表达48例ALA-PDT治疗前CA细胞中Survivin阳性表达38例,阳性表达率为79.16%(38/48),Survivin表达强度多为++~+++;48例ALA-PDT治疗后CA组织细胞中Survivin阳性表达20例,阳性表达率为41.67%(20/48),Survivin表达强度多为+;治疗前后两组阳性表达率差异具有统计学意义(χ~2=14.11,P<0.001),两组阳性表达强度差异具有统计学意义(H=19.72,P<0.001)。3 Bcl-2和Survivin在光动力后CA组织细胞中表达的相关性分析48例ALA-PDT治疗后CA组织中Bcl-2阳性表达18例,阴性30例;Survivn阳性表达20例,阴性28例。Spearman相关性分析发现,ALA-PDT治疗后48例CA组织中Bcl-2和Survivin表达呈正相关(r=0.480,P<0.05)。结论1 ALA-PDT治疗后CA组织中Bcl-2的阳性表达率和表达强度明显降低,提示ALA-PDT治疗可能通过降低Bcl-2的表达,促进CA细胞凋亡,抑制其增殖。2 ALA-PDT治疗后CA组织中Survivin阳性表达率和表达强度明显降低,提示ALA-PDT治疗可能通过降低Survivin的表达,促进CA细胞凋亡,抑制其增殖。3 ALA-PDT治疗后Bcl-2和Survivin表达降低呈正相关,提示ALA-PDT治疗后降低的二者可能协同作用,促进CA细胞凋亡,抑制其增殖。