水稻C2H2型锌指蛋白家族转基因材料的获得及耐冷相关性状分析

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C2H2型转录因子是锌指结构转录因子家族的主要成员之一,在植物生长、发育及抗逆等方面有重要的调节作用。本研通过GatewayTM技术从日本粳稻品种“日本晴”中克隆到71个C2H2型锌指结构蛋白转录因子基因,并将其构建到经过改造的植物表达载体pCambia1301上,用农杆菌介导法将目的基因转入日本早熟水稻品种“Kitaake”中。主要研究结果如下:1. C2H2锌指结构家族基因的克隆和转化以日本粳稻品种“日本晴”为材料,利用GatewayTM技术克隆得到编码C2H2型锌指蛋白转录因子的基因,构建转录激活表达载体VP64pCambia1301-UbiN和转录抑制表达载体EAR-pCambia1301-UbiN上,然后通过农杆菌介导法进行遗传转化,最终获得该家族71个基因335个T1代转基因植物。2.T1代转基因水稻优良株系的筛选依据T1代转基因水稻材料的产量性状及抽穗期等检测结果,共计筛选出38个有产量优势、生育期与对照接近的C2H2型锌指蛋白转录因子基因共105个株系材料进行后续的田间表型鉴定试验。3. T2代转基因水稻农艺性状分析T2代转基因水稻材料与野生型的7个农艺性状的差异显著性检验结果,在长春,38个基因中20个基因与野生型之间存在显著差异,而在和龙冷水灌溉条件下,29个基因与野生型之间存在显著差异。通过耐冷鉴定筛选了C2H2-10,C2H2-12,C2H2-44,C2H2-69等四个耐冷基因及C2H2-30、C2H2-37、C2H2-91等三个低温敏感基因。
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