本研究成功建立了用间接免疫过氧化物酶染色法(Indirect Immunoperoxidase Staining Methods,IISM)检测RA抗原，经交叉试验、吸收试验、替代试验和阳性、阴性对照试验表明该法具有敏感性高，特异性好的优点。该方法工作的最佳条件为：用4％的中性多聚甲醛液固定组织，以APES(3-Amino Propyltriethoxy Silane)为粘片剂，石蜡切片在60℃下处理1h后进行间接法染色，一抗稀释度为1∶25，酶标二抗(HRP)的工作浓度为1∶25，1％的盐酸修复抗原30min，3％的过氧化氢甲醇溶液处理样品20min，一抗培育时间为37℃下60min，酶标二抗培育时间为37℃下30min，封闭血清培育时间为37℃下30min，DAB(3，3’-diaminobenzidine tetrahydrochloride；3，3’-二氨基联苯胺四盐酸盐)显色1min，可获得较满意的染色效果。 雏鸭经皮下和滴鼻两种途径人工感染鸭源血清1型里默氏杆菌后，成功复制了人工病例，出现了纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎等典型症状，人工感染6小时后，部分鸭只出现流泪症状，12小时后，饮欲大幅下降，食欲废绝，排褐色稀粪。18小时后，个别鸭只开始有神经症状出现，主要是倒地后不能反正，嗜睡，头部稍肿大，排白色稀粪，欲睡不睡，有如点头一般，有时尖声锐叫，头颈收缩，有如畏冷，蹲伏不能站立，一翅伸出，眼睛混浊，有失明症状。皮下组有一只出现死亡，剖检无明显病变。24小时镜检发现部分器官有充血出血现象。36小时后病理变化趋于明显，其病理损害也更为严重，皮下和滴鼻组都开始出现死亡，其中皮下组死亡率呈尖峰式上升，死亡率为40.9％，达到最高。滴鼻组死亡率也高达31.8％，50小时后，皮下组死亡率开始下降，死亡率为13.6％，而滴鼻组的死亡率达到峰值，为50％。皮下组潜伏期较短(18小时)，总死亡率达66.7％，滴鼻组潜伏期较长(48小时)，总死亡率高达95.5％。剖检出现鸭疫里默氏杆菌病的特征性病变，即纤维素性心包炎，肝周炎，气囊炎。 发病和死亡鸭组织学特征为心脏发生出血水肿，心肌炎，心肌纤维溶解消失；肝脏出血，肝细胞发生颗粒变性和空泡变性、最终崩解、坏死，；肺脏出血，嗜中性粒细胞浸润，肺房细胞发生颗粒变性；肾脏出血，肾小球增生，小管变性，淋巴细胞和嗜中性粒细胞浸润；肠道出现肠绒毛断裂，肠壁肌肉断裂溶解，肠腺萎缩，肠绒毛上皮细胞出现空泡变性等。其中免疫器官脾脏出血，淋巴细胞减少，颗粒变性，嗜中性粒细胞浸润；法氏囊出现粘膜上皮变性脱落，滤泡萎缩，皮质、髓质淋巴细胞减少，上皮细胞增生；胸腺则出现纤维素性渗出，嗜中性粒细胞浸润等。脑部病变较不明显，部分血管充血，有小胶质神经细胞浸润等。 人工感染的雏鸭肝脏和肠道的RA抗原阳性检出率最高，其中十二指肠的平均检出率最高(达到60.5％)，肝为56.6％，直肠为53.7％，盲肠为51.9％；肺、肾和免疫器官(脾、法氏囊和胸腺)的平均检出率也较高(肺为45.7％，肾为40％，脾为46.8％，法氏囊为45％，胸腺为41.7，胰、心的检出率相对较低(胰为39.4％，心为37.7％)，脑和腺胃的检出率都很低(不到20％)。抗原广泛分布于肝细胞、肠道的上皮细胞、肠腺细胞，肺泡壁细胞和肾小管的上皮细胞内；免疫器官中脾分布于白髓的淋巴细胞、网状细胞、法氏囊则分布于淋巴滤泡髓质的淋巴细胞，胸腺则分布于皮质髓质的淋巴细胞内；胰在腺细胞和间质细胞内有分布；脑分布于脑膜，腺胃也少量分布于粘膜层和粘膜下层细胞内。上皮细胞为RA抗原的主要靶细胞。RA为胞内寄生菌。