目的观察非小细胞肺癌肿瘤组织、癌旁正常肺组织及淋巴结中VEGF-C、VEGFR-3及BMP-9的表达情况,并结合临床病理特征分析其表达在非小细胞肺癌原发病灶进展及淋巴结转移等生物学行为中的意义。方法选择行肺叶切除+淋巴结清扫术、术后我院病理证实的NSCLC患者的组织标本为研究对象,并收集患者的完整病例资料。总共收集到入组患者的51例肿瘤组织、51例对应的癌旁正常肺组织、43枚癌转移淋巴结(其中8例N1期患者:N1期淋巴结15枚;16例N2期患者:N1期淋巴结9枚,N2期淋巴结19枚)及51枚非转移性淋巴结(患侧10组或11组)。采用免疫组织化学法分别检测51例NSCLC癌组织及51例正常肺组织中VEGF-C、VEGFR-3和BMP-9的表达,分别检测43枚癌转移阳性淋巴结及51枚非转移淋巴结中VEGF-C、VEGFR-3的表达。结合阳性细胞百分率和细胞总体染色强度对组织染色结果进行半定量积分分析,计算出对应的阳性表达率,最后经统计发现VEGF-C、VEGFR-3和BMP-9在不同性别、年龄、吸烟史、肿瘤组织类型、肿瘤T分期、淋巴结转移情况、淋巴结N分期及转移淋巴结数目等亚组的阳性表达率,并分析VEGF-C、VEGFR-3和BMP-9的表达在亚组间的统计学关系及内在联系。结果1.VEGF-C阳性表达为棕黄色,主要位于癌细胞胞质内。N0期亚组、N1期亚组、N2期亚组中肿瘤组织VEGF-C表达率均显著高于对应的癌旁正常肺组织(P<0.05)。肿瘤组织中VEGF-C的表达在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。正常肺组织中VEGF-C的表达在无淋巴结转移组高于有淋巴结转移组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织VEGF-C的表达在N2期亚组高于N1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织VEGF-C的表达在N2期亚组高于N0期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织VEGF-C的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组高于0(LN+)亚组,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。癌组织VEGF-C的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组高于1~2(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织VEGF-C的表达在淋巴结转移数目0(LN+)亚组高于≥3(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织VEGF-C的表达在淋巴结转移数目1~2(LN+)亚组高于≥3(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在无淋巴结转移的肿瘤组织中,VEGF-C的表达在T3-4期亚组高于T2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在无淋巴结转移的正常肺组织中,VEGF-C的表达在T3-4期亚组高于T2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。2.VEGFR-3阳性表达为棕黄色,主要位于淋巴管内皮细胞和部分癌细胞胞浆。N0期亚组、N1期亚组、N2期亚组中肿瘤组织VEGFR-3表达率均显著高于对应的癌旁正常肺组织(P<0.05)。肿瘤组织中VEGFR-3的表达在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织中VEGFR-3的表达在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织VEGFR-3的表达在N2期亚组高于N1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织VEGFR-3的表达在N2期亚组高于N0期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织VEGFR-3的表达在N2期亚组高于N1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织VEGFR-3的表达在N2期亚组高于N0期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织VEGFR-3的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组高于0(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织VEGFR-3的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组高于0(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在无淋巴结转移的NSCLC正常肺组织中,VEGFR-3的表达在T3-4期亚组高于T1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在无淋巴结转移的NSCLC正常肺组织中,VEGF-C的表达在T3-4期亚组高于T2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。3.BMP-9阳性表达为棕黄色,主要位于正常癌旁肺组织细胞及部分癌细胞、巨噬细胞胞质。N0期亚组、N2期亚组的癌旁正常肺组织BMP-9表达显著高于对应的肿瘤组织(P<0.05)。N1期亚组的肿瘤组织BMP-9表达显著高于对应的癌旁正常肺组织(P<0.05)。肿瘤组织中BMP-9的表达在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。正常肺组织中BMP-9的表达在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织BMP-9的表达在N1期亚组高于N0期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。癌组织BMP-9的表达在N1期亚组高于N2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织BMP-9的表达在N2期亚组高于N0期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织BMP-9的表达在N2期亚组高于N1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织BMP-9的表达在N2期亚组高于N0期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。癌组织BMP-9的表达在淋巴结转移数目1~2(LN+)亚组高于0(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。癌组织BMP-9的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组高于0(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。正常肺组织BMP-9的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组高于0(LN+)亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在有淋巴结转移的NSCLC肿瘤组织中,BMP-9的表达在T3-4期亚组高于T1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在有淋巴结转移的NSCLC肿瘤组织中,BMP-9的表达在T3-4期亚组高于T2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在有淋巴结转移的NSCLC正常肺组织中,BMP-9的表达在T3-4期亚组高于T1期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在有淋巴结转移的NSCLC正常肺组织中,BMP-9的表达在T3-4期亚组高于T2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。在无淋巴结转移的NSCLC肿瘤组织中,BMP-9的表达在T3-4期亚组高于T2期亚组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。4.肿瘤组织及癌旁组织中VEGF-C、VEGFR-3、BMP-9的表达在各个性别、年龄、吸烟史、肿瘤组织类型亚组之间均无显著差异(P>0.05)。5.淋巴结VEGF-C的表达在N1期亚组较N0期亚组升高,差异有显著统计学意义(P<0.05);淋巴结VEGFR-3的表达在N1期亚组较N0期亚组升高,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。淋巴结VEGF-C的表达在N2期亚组较N1期亚组升高,差异有非常显著统计学意义(P<0.01);淋巴结VEGFR-3的表达在N2期亚组较N1期亚组升高,差异有显著统计学意义(P<0.05)。淋巴结VEGF-C的表达在N2期亚组较N0期亚组升高,差异有非常显著统计学意义(P<0.01);淋巴结VEGFR-3的表达在N2期亚组较N0期亚组升高,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。6.VEGF-C、VEGFR-3在所有入组的51例NSCLC癌组织中的表达存在明显的正相关(r=0.346,P<0.05);VEGF-C、VEGFR-3在有淋巴结转移的24例NSCLC癌组织中的表达存在明显的正相关(r=0.755,P<0.01)。VEGF-C、VEGFR-3在所有入组的43例NSCLC转移淋巴结中的表达亦存在明显的正相关(r=0.436,P<0.01);VEGF-C、VEGFR-3在23例N1期NSCLC淋巴结中的表达亦存在明显的正相关(r=0.874,P<0.01);VEGF-C、VEGFR-3在44例N2期NSCLC淋巴结中的表达亦存在明显的正相关(r=0.702,P<0.01)。结论1.VEGF-C、VEGFR-3在不同N分期的NSCLC癌组织中的表达均较癌旁组织明显增高。VEGF-C、VEGFR-3在NSCLC肿瘤组织中的表达均与淋巴结转移有显著的相关性。VEGF-C、VEGFR-3在NSCLC正常肺组织中的表达均与淋巴结转移有显著的相关性。NSCLC癌组织VEGF-C、VEGFR-3的表达在N2期亚组较N1期亚组、N0期亚组均显著升高。NSCLC正常肺组织VEGFR-3的表达在N2期亚组较N1期亚组、N0期亚组均显著升高。癌组织VEGF-C、VEGFR-3的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组较0(LN+)亚组均显著升高。癌组织VEGF-C的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组较1~2(LN+)亚组显著升高。NSCLC正常肺组织VEGF-C、VEGFR-3的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组较0(LN+)亚组均显著升高。NSCLC正常肺组织VEGF-C的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组较1~2(LN+)亚组显著升高。在无淋巴结转移的肿瘤组织及正常肺组织中,VEGF-C在T3-4期亚组的表达显著高于T2期亚组。在无淋巴结转移的NSCLC正常肺组织中,VEGFR-3的表达在T3-4期亚组高于T1期亚组、T2期亚组。VEGF-C、VEGFR-3在有淋巴结转移的肿瘤组织中的表达具有明显正相关性,且两者在转移淋巴结中的表达亦具有明显正相关性。VEGF-C、VEGFR-3在淋巴结中的表达与淋巴结N分期显著相关。我们观察到在NSCLC肿瘤组织及转移淋巴结中VEGF-C、VEGFR-3的表达上调与既往文献报告中其他恶性肿瘤组织的两者表达情况类似,VEGF-C、VEGFR-3可能参与NSCLC原发癌灶局部侵袭、淋巴管生成及淋巴结转移。2.BMP-9在N0期及N2期的NSCLC癌组织中的表达较癌旁组织显著降低,而在N1期癌组织中的表达较癌旁组织显著升高。BMP-9在NSCLC肿瘤组织及正常肺组织中的表达与淋巴结转移均存在显著的相关性。NSCLC肿瘤组织BMP-9的表达在N1期亚组较N0期亚组、N2期亚组显著升高,在N2期亚组较N0期亚组亦显著升高。肿瘤组织BMP-9的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组较0(LN+)亚组显著升高,在淋巴结转移数目为1~2(LN+)亚组较0(LN+)亚组亦显著升高。正常肺组织BMP-9的表达在N2期亚组较N1期亚组、N0期亚组均显著升高。正常肺组织BMP-9的表达在淋巴结转移数目≥3(LN+)亚组较0(LN+)亚组显著升高。在有淋巴结转移的肿瘤组织中,BMP-9在T3-4期亚组的表达显著高于T2期亚组、T1期亚组。在有淋巴结转移的正常肺组织中,BMP-9在T3-4期亚组的表达显著高于T2期亚组、T1期亚组。在无淋巴结转移的肿瘤组织中,BMP-9在T3-4期亚组的表达显著高于T2期亚组。我们观察到在无淋巴结转移的NSCLC肿瘤组织BMP-9的表达相对癌旁组织下降,而在有淋巴结转移的NSCLC肿瘤组织及正常肺组织中BMP-9表达相对升高的现象与既往文献报告中其他恶性肿瘤组织的BMP-9表达情况类似,BMP-9可能与NSCLC原发癌灶局部侵袭、肿瘤淋巴管生成及淋巴结转移相关。3.NSCLC肿瘤组织及癌旁组织中VEGF-C、VEGFR-3、BMP-9的表达均与患者性别、年龄、吸烟史、肿瘤组织类型无相关性。4.VEGF-C、VEGFR-3在NSCLC肿瘤组织、癌旁正常肺组织及淋巴结中的表达与NSCLC淋巴管生成、淋巴结转移具有一定正相关性,而BMP-9在NSCLC肿瘤组织、癌旁组织中的表达与NSCLC淋巴管生成、淋巴结转移具有一定负相关性。以上结论有益于进一步研究NSCLC转移的正负靶向调控治疗。