[目 的]研究编码蛋白质DNA缺口受体1（Notch1）在鼻咽癌（Nasopharyngeal Carcinoma,NPC）组织中的表达情况,探讨当下调Notch1基因表达后对人鼻咽癌5-8F细胞系的增殖、侵袭、迁移、凋亡等细胞学功能的影响,探索Notch1基因在高转移性鼻咽癌发生发展过程中的作用。[方 法]按照纳入和排除标准将2020年11月-2021年12月在云南省肿瘤医院耳鼻喉头颈外科接受鼻咽镜下取材确诊为鼻咽癌的30例患者纳入。收取鼻咽癌组织标本及癌旁正常组织标本30对。采用实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测鼻咽癌组织及癌旁正常组织中的Notch1基因的表达,进行相关统计学分析。构建敲低Notch1基因表达的质粒,并将其与空载体质粒分别转染至人鼻咽癌细胞系5-8F细胞内,实验分为三组,分别为:空白对照组（Blank）、空载体阴性对照组（NC）、实验组（Notch1-shRNA）。转染完成后采用实时荧光酶链聚合链反应（qPCR）检测各组细胞中Notch1的表达量,验证其转染效率,Notch1表达量下降大于50%以上表明转染成功。接着采用MTT 比色法对细胞相应计数,并通过细胞克隆试验,检测这三组细胞的生长与增殖能力;细胞迁移实验（划痕实验）检测这三组细胞的迁移能力;Transwell小室侵袭实验则用来检测这三组细胞的侵袭性；流式细胞学实验检测敲低Notch1基因后对5-8F细胞凋亡的影响。统计学方法:选择独立样本t检验以及x2检验对于所收集的各个实验数据进行相应统计学处理。在进行统计推断之前应对数据进行相应的正态性和方差齐性检验,两两比较采用独立样本t检验,三组比较采用x2检验,以p＜0.05表示差异具有统计学意义。[结 果]1.利用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）,研究发现相对于癌旁正常组织,鼻咽癌组织中的Notch1的△CT值更高,癌细胞组中Notch1的相对表达量明显上调,[（1.5740±1.6093）VS（0.5176±0.4075）,p＜0.05],差异具有统计学意义。2.利用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）,测定不同头颈部鳞癌细胞株与正常组织细胞株NP69,选取其中Notch1表达量最高的头颈部鳞状细胞癌细胞株。研究显示Notch1表达量在鼻咽癌5-8F细胞系内的表达量最高（M=3.44654）,因此选取5-8F细胞株作为后续研究所用。3.构建敲低Notch1基因表达的质粒,并转染至5-8F细胞株后,利用qPCR测定Notch1的表达量,与Blank组相比,Notch1-shRNA组内5-8F细胞中的Notch1的△CT 明显更低,[（0.6538±0.0186）VS（1.0100±0.1795）,P＜0.05],二者之间的差异具有统计学意义,表明Notch1低表达质粒转染成功。4.蛋白印迹实验显示,若以Blank组的灰度值为基数,则NC组Notch1-shRNA组分别为Blank组的0.7716倍和0.2468倍,均降低,而Notch1-shRNA组的Notch1 基因表达量仅为正常组的 1/5,[（1.0000±0.0000）VS（0.2468±0.0000）,P＜0.05],差异有统计学意义,提示shRNA转染后直接干扰了 Notch1的蛋白翻译,明显降低其表达,以影响下游基因表达网络。5.细胞计数实验显示,相对于Blank组,NC组细胞生长能力无明显下降,[（0.6869±0.4497）VS（0.6461±0.4191）,P=0.481],差异无统计学意义;然而在Notch1-shRNA组中,5-8F细胞生长能力显著下降,[（0.6869±0.4497）VS（0.4926±0.3380）,P＜0.05],表示差异具有统计学意义。6.细胞克隆实验结果显示,10天后比较Blank组与NC组,5-8F细胞的克隆能力无明显区别,[（406.3333±9.5044）VS（338.3333±50.2925）,P＞0.05],差异无统计学意义,而在Notch1-shRNA组中可明显观察到细胞克隆数减少[（406.3333±9.5044）VS（274.0000±8.1854）,P＜0.05],差异有统计学意义,表明Notch1低表达的5-8F细胞克隆能力明显被抑制。7.划痕实验来检测细胞的迁移能力,实验结果显示,48小时后相对于Blank组,NC组空白面积显示增大趋势,说明NC组的迁移率降低,但差异无统计学意义[（8.1571±0.4506）VS（7.3291±0.5031）,P＞0.05],然而对于 Notch1-shRNA组,空白面积明显增大,说明Notch1-shRNA组的迁移率更低了,[（8.1571±0.4506）VS（4.8197 ± 0.4131）,P＜0.05],差异有统计学意义,表明 Notch1低表达的5-8F细胞迁移能力明显被抑制。8.Transwell小室侵袭实验显示,相对于Blank组,NC组细胞侵袭能力呈现下降趋势[（289.0000±13.0000）VS（253.3300±14.3600）,P＜0.05],然而Notch1-shRNA组与Blank组相比时,5-8F细胞的侵袭能力下降更为显著[（289.0000±13.0000）VS（180.0000 ± 7.9300）,P＜0.01],两者之间的差异具有统计学意义,表明Notch1低表达的5-8F细胞侵袭能力明显被抑制。9.流式细胞学检测细胞调亡实验结果显示,与Blank组相比,NC组细胞凋亡率虽然呈现一定的增加趋势,[（0.0067±0.1628）vs（10.6300±0.2193）P＞0.05],差异无统计学意义,然而Notch1-shRNA组中细胞凋亡率明显增加[（0.0067±0.1628）vs（38.6633±3.0553）P＜0.05],差异具有统计学意义,表明Notch1低表达的5-8F细胞更容易发生凋亡。[结 论]1、Notch1在鼻咽癌组织和高转移性鼻咽癌5-8F细胞系中呈现高表达。2、敲低Notch1基因后能明显抑制鼻咽癌5-8F细胞的增殖、迁移和侵袭能力,且其凋亡数量显著增加。