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第一部分超声介入硬化治疗后输卵管积液成分的变化【目的】探明超声介入硬化治疗后输卵管积液成分及性质的改变。【方法】随机选取输卵管积液患者16例,分别取超声介入硬化治疗前(A组)后(B组)输卵管积液样本各16份,分别检测pH值、K+、Na+、Cl-、Ca2+、Mg2+、总蛋白、葡萄糖浓度,TNF-α、LIF、VEGF、IGF-1、NO、ET-1、PGI2、TXA2水平,以及细菌、支原体、衣原体、淋球菌,进行自身对照比较。【结果】A组、B组输卵管积液的pH值均偏碱性,B组的pH值(8.23±0.77)较A组pH值(8.46±0.82)略低,但差异无统计学意义。B组K+、Ca2+、总蛋白、葡萄糖浓度较A组上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。B组TNF-α水平显著降低(P<0.05)。B组支原体阳性率为25.00%(4/16)、衣原体阳性率为12.5%(2/16),低于A组的31.25%(5/16)和18.75%(3/16),但差异无统计学意义。A组、B组均未发现细菌及淋球菌生长。【结论】硬化治疗后积液部分成分包括K+、Ca2+、总蛋白、葡萄糖浓度的变化,可降低其胚胎毒性作用;细胞因子TNF-α水平的降低有助于改善子宫内膜容受性。第二部分输卵管积液超声介入硬化治疗对种植窗期子宫内膜超微结构及相关细胞因子的影响【目的】通过观察种植窗期子宫内膜胞饮突以及子宫内膜容受性标记分子的变化探讨硬化治疗对子宫内膜容受性的影响。【方法】随机取10例输卵管积液患者治疗前后种植窗期子宫内膜标本,扫描电镜观察子宫内膜胞饮突的变化,并与10例单纯管性不孕患者子宫内膜作比对。同时随机抽取未接受硬化治疗的输卵管积液患者17例(A组),硬化治疗后患者16例(B组),以20例单纯管性不孕患者作为对照(C组),分别采集种植窗期子宫内膜组织,免疫组化法检测VEGF、IGF-1、αVβ3、HOXA10的表达水平。【结果】硬化治疗后胞饮突的发育程度和丰富程度与对照组相似,较治疗前显著增加。B组VEGF、αVβ3及HOXA10表达水平显著高于A组(P<0.05);A组IGF-1水平显著低于C组(P<0.05),B组IGF-1与A组、C组间无显著性差异(P>0.05)。【结论】治疗后子宫内膜胞饮突明显增加,子宫内膜容受性标记分子VEGF、IGF-1、αVβ3、HOXA10水平均显著升高。第三部分超声介入硬化治疗后输卵管积液患者种植窗期子宫内膜基因表达谱的研究【目的】探讨超声介入硬化治疗后输卵管积液患者种植窗期子宫内膜基因表达谱的改变。【方法】随机抽收集4例输卵管积液患者硬化治疗前(A组)后(B组)种植窗期子宫内膜样本,以4例单纯管性不孕患者种植窗期子宫内膜样本作为对照(C组),应用Human Gene Expression 4x44K v2 Microarray全基因组表达谱芯片(Agilent)对样本进行基因表达谱检测,Me V分析软件对差异表达基因进行分层聚类(hierarchical clustering),GO(Gene Ontology)及KEGG(Kyoto Encylopedia of Genes and Genomes)分析软件进行基因本体论及信号通路分析,实时定量PCR(RT-PCR)验证差异表达基因。【结果】硬化治疗前子宫内膜样本(A组)与硬化治疗后(B组)及单纯管性不孕患者(C组)存在大量差异表达基因。差异基因分层聚类分析显示,A、B、C三组四个样本各聚为一组,表明A组与B组、C组之间均存在基因表达的差异,B组的表达更接近于C组。ITGA3、MEGF6、KRT79等基因与VEGF聚类为同一小组,可能具有与VEGF相似的功能,与子宫内膜容受性密切相关。RT-PCR结果同芯片结果具有一致性。【结论】输卵管积液可改变种植窗期某些与子宫内膜容受性密切相关的基因表达,对子宫内膜容受性产生负面影响,而超声介入硬化治疗可改变上述基因的上调或下调,改善积液患者的子宫内膜容受性,从而改善输卵管积液患者IVF临床结局。