【摘 要】
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目的:旨在探索宫腔内灌注粒细胞集落刺激因子(Granulocyte Colony-Stimulating Factor,G-CSF)对大鼠薄型子宫内膜的改善作用及其可能机制,为临床上G-CSF治疗薄型子宫内膜提供实验基础。方法:取性成熟(6-8周)雌性SD大鼠20只,随机分为I组(造模实验组):共10只,行单侧宫腔内无水乙醇保留灌注5分钟,对侧等时等量生理盐水灌注;II组(治疗实验组):共10只,
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目的:旨在探索宫腔内灌注粒细胞集落刺激因子(Granulocyte Colony-Stimulating Factor,G-CSF)对大鼠薄型子宫内膜的改善作用及其可能机制,为临床上G-CSF治疗薄型子宫内膜提供实验基础。方法:取性成熟(6-8周)雌性SD大鼠20只,随机分为I组(造模实验组):共10只,行单侧宫腔内无水乙醇保留灌注5分钟,对侧等时等量生理盐水灌注;II组(治疗实验组):共10只,行双侧宫腔内无水乙醇保留灌注5分钟。造模3个动情周期后对I组的10只大鼠取材检测;同时对II组的10只大鼠行单侧宫腔内30μg/kg的G-CSF保留灌注5分钟,对侧等时等量生理盐水灌注。3个动情周期后对II组的10只大鼠取材检测。行苏木精-伊红染色(hematoxylin and eosin stain,HE)观察子宫内膜的厚度和形态学变化,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测内膜细胞角蛋白和波形蛋白的表达情况。采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantification polymerase chain reaction,q RT-PCR)及蛋白免疫印迹实验(Western Blot,WB)检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)等相关细胞因子表达情况。结果:1.A组(正常内膜组)、B组(薄型内膜组)、C组(生理盐水治疗组)和D组(G-CSF治疗组)的子宫内膜厚度分别为678.11±14.79μm、319.91±26.33μm、368.13±19.51μm、565.17±19.44μm,A组与B组间,C组与D组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);2.四组角蛋白的平均光密度值分别为:0.43±0.02、0.14±0.03、0.13±0.03、0.41±0.03;波形蛋白平均光密度值分别为:0.50±0.02、0.16±0.03、0.19±0.02、0.40±0.02。A组与B组间,C组与D组间角蛋白、波形蛋白的平均光密度值比较差异均有统计学意义(P<0.05);3.四组VEGF的m RNA相对表达量分别为:1.013±0.070、0.411±0.027、0.483±0.040、0.936±0.114;LIF的m RNA相对表达量分别为:1.012±0.071、0.330±0.105、0.361±0.084、1.036±0.104。A组与B组间,C组与D组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。4.Western Blot结果显示:四组VEGF相对表达量分别为:0.437±0.016、0.300±0.016、0.281±0.016、0.399±0.013;LIF相对表达量分别为:0.331±0.017、0.202±0.006、0.201±0.005、0.287±0.011。A组与B组间,C组与D组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:宫腔内灌注G-CSF可有效提高大鼠薄型子宫内膜厚度、角蛋白和波形蛋白表达水平。其改善作用的机制可能与上调VEGF表达促进局部血管新生和上调LIF表达改善内膜容受性有关。
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