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大多数革兰氏阴性植物病原菌利用Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)将毒力蛋白注射(转移)到寄主细胞体内致使寄主发生病害。Xcc 8004通过hrp基因编码相对保守的T3SS能将Ⅲ型效应物注射进宿主细胞体内,而引发在寄主植物上的致病和非寄主植物上产生HR。在XZM培养基上,利用本实验室Xcc 8004菌株的Ⅲ型效应物蛋白基因XC0241启动子融合细菌荧光酶luxAB报告系统pLux0241,从国家小分子化合物资源中心公共平台小分子化合物库(http://www.chemicallibrary.org.cn/11115.html)的 26 个库即 17082 个小分子化合物中,高通量筛选诱导Xcc 8004 T3SS的小分子化合物。这将有助于我们发现新的先导化合物、新靶标和建立新型抗病策略提供了新的种子线索。本实验通过Synergy H1全功能酶标仪检测添加不同小分子化合物报告菌株8004/pLux0241在XZM培养基上培养后的LuxAB酶活。结果表明,XZM培养基上添加终浓度30μM Splitomycin和SB204741小分子化合物的Lux值显著高于对照组DMSO(小分子化合物保存于DMSO);同时,Splitomycin和SB204741小分子化合物在XVM2、XCM1培养基上的LuxAB酶活也高于对照组DMSO,且不影响菌体的生长。为进一步验证Splitomycin和SB204741这两个小分子化合物对Xcc 8004 T3SS的影响,通过GUS报告系统进行再次检验,结果显示Splitomycin和SB204741小分子化合物在XZM、XVM2培养基上的GUS值同样显著高于对照组DMSO。分析RT-PCR和qRT-PCR检测结果,以16S rRNA作为校正的内参基因,鉴定这两种小分子化合物对T3SS影响的特异性,发现添加Splitomycin和SB204741小分子化合物后XC0241和hrpX基因的相对转录水平提高,而XC1638(T4SS)、XC0749(T2SS)和hrpG基因的转录水平没有显著性的改变。由此推测Splitomycin和SB204741可能特异性诱导T3SS的XC0241和hrpX基因的转录表达。通过压渗法检测过敏反应(HR),发现Splitomycin和SB204741对Xcc 8004在辣椒上的HR没有发现提前或者延迟现象。用喷雾法进行致病力的检测,发现Splitomycin对Xcc 8004寄主满身红萝卜的致病性有一定的影响,但SB204741对致病力没有影响。