背景与目的食管鳞状细胞癌是一种发生率高、死亡率高的癌症。2020年报道食管癌在全球发病率排名第六,死亡率排名第六,5年生存率为20%,其中53%的食管癌发生在中国,而在中国90%食管癌是食管鳞状细胞癌,其中又以广东潮汕、河北、福建、重庆、河南为5个高发区,说明食管鳞癌具有地区特色。目前,食管鳞癌的病因尚未明确,多认为与吸烟、饮酒、生活习惯、饮食习惯相关。近年来,由于高通量测序技术的发展,肿瘤微生态的研究已成为目前热点之一。研究发现在多种肿瘤组织及其癌旁正常组织中普遍存在细菌,这些细菌的种类差异与肿瘤发生及PD-1等免疫治疗疗效相关。而小鼠结直肠癌组织测序研究也表明:原发癌灶和转移灶标本中微生物群保持着一定的稳定性。因此,基于以上研究,我们使用高通量测序方法研究广东潮汕食管鳞癌患者组织中的微生物菌群,在食管鳞癌患者癌组织中找出特异性表达的细菌,并通过免疫组化的方法探讨与食管鳞状细胞癌PD-L1表达的关系。方法本研究纳入ESCC（esophageal squamous cell carcinoma,食管鳞状细胞癌）患者共105例,健康对照组54例。其中食管癌组织标本来源于于广东省人民医院胸外科及病理科,健康受试者取本院体检人群,其中筛选组食管鳞状细胞癌患者42例,健康对照组37例,提取组织标本DNA,然后进行高通量测序分析,筛选出靶细菌。随后使用采用绝对定量PCR的方法分别在63例食管鳞癌患者及17例健康对照者标本中进行靶细菌的验证。再对照免疫组化方法检测相同食管鳞状细胞癌切片组织中PD-L1的表达,分析其与靶细菌的关系。结果多样性分析数据提示食管鳞癌组与健康对照组多样性差异较少,物种分析则提示与健康对照组相比,在属水平上,食管鳞状细胞癌组的卟啉单胞菌属、梭杆菌属的比例较高,分别为8.2%、10.3%,普氏菌属比例较低,占比3%,均有统计学差异。利用绝对定量PCR方法对组织中牙龈卟啉单胞菌及具核梭杆菌进行验证,其结果提示ESCC组患者组织牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌的拷贝数均比健康对照组高,根据样本中牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌的拷贝数与食管鳞状细胞癌的关系绘制ROC曲线,AUC分别为:0.902、0.708。免疫组化分析结果表明牙龈卟啉单胞菌阳性及具核梭杆菌阳性菌与PD-L1表达阳性相关。结论1.与健康对照组相比,卟啉菌属、梭杆菌属在食管鳞状细胞癌患者组织中明显升高。2.与健康对照组相比,食管鳞状细胞癌组织中牙龈卟啉单胞菌及具核梭杆菌拷贝数明显升高。3.牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌阳性与食管鳞状细胞癌组织PD-L1表达升高相关。