【摘 要】
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背景肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的肿瘤免疫浸润与临床预后密切相关。肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocytes,TILs)参与调控肿瘤的进展,是一种肿瘤免疫微环境中有吸引力的治疗靶点和预后指标。以调节性T细胞(T cells regulatory,Tregs)为代表性的多种TILs是目前ccRCC肿瘤免
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背景肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的肿瘤免疫浸润与临床预后密切相关。肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocytes,TILs)参与调控肿瘤的进展,是一种肿瘤免疫微环境中有吸引力的治疗靶点和预后指标。以调节性T细胞(T cells regulatory,Tregs)为代表性的多种TILs是目前ccRCC肿瘤免疫调控机制的研究热点。目的1.研究ccRCC肿瘤微环境中TILs的组成,探索ccRCC的TILs表达情况与患者预后等临床信息的关系,以了解TILs对ccRCC的预后预测价值;2.评估Tregs和免疫调节分子PD-1作为中晚期ccRCC预后生物学标记物的可行性;3.初步分析Tregs与PD-1的潜在关系,为抗PD-1/PD-L1等免疫检查点抑制剂的疗效预测手段寻求新的线索。方法1.基于TCGA数据中611个ccRCC的基因表达谱,运用以CIBERSORT包为核心的R语言程序包,分析22种TILs在ccRCC中的表达差异及其与临床分期、病理分级相关的临床意义,Log-Rank检验差异分析及Cox 比例风险回归分析评估TILs与总生存期(Overall Survival,OS)的相关性。2.对2015年至2018年在广东省人民医院接受根治性或部分肾切除术的中晚期ccRCC患者进行筛选入组、临床特征及病理资料整理,并做好随访记录。运用免疫组织化学法对组织切片进行处理,回顾性分析中晚期ccRCC患者Tregs及PD-1的表达情况与患者OS之间的关系进行生存分析,验证其与临床结局的关系,并初步探究Tregs与PD-1的关联。结果1.基于TCGA数据库分析TILs在ccRCC的表达及预后相关研究:从TCGA的ccRCC队列中我们发现ccRCC的TILs浸润以T细胞为主,高表达量的未活化树突状细胞和未活化的肥大细胞与ccRCC良好的预后显著相关(p=0.03、0.011);相比之下,高表达量的Tregs、滤泡辅助性T细胞及活化的记忆性CD4+T细胞的ccRCC患者则预后较差(p=0.008、0.044 和 0.049)。2.Tregs与PD-1的表达在中晚期ccRCC中的预后价值研究:共72例患者符合标准被纳入验证队列。通过免疫组化回顾性分析验证了 Tregs高表达的中晚期ccRCC患者OS较差,差异有统计学意义(p<0.05);但PD-1对ccRCC的OS的影响则未发现统计学差异。结论本研究通过回顾性分析表明ccRCC是一种TILs富集的肾癌类型,多种TILs与ccRCC的临床分期及病理分级具有相关性,且各类细胞的表达丰度与ccRCC的预后相关性不一,其中较具有代表性的免疫细胞Tregs的丰度增加可作为一个独立指标提示ccRCC预后不良,以弥补PD-1等指标无法准确预测预后的不足。
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